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目的:通过对鹿角药材两个用药部位鹿角与鹿角脱盘的定性鉴别与化学成分分析,分析两者的区别与共性;并以同为鹿骨化部分的鹿骨作为对照,为鹿角药材的鉴定及其质量控制提供依据。材料与方法:材料:样品为鹿角药材5批,鹿角脱盘药材4批,鹿骨1批。方法:1鹿角药材定性鉴别1.1显微鉴别研究分别观察鹿角、鹿角脱盘及鹿骨的显微结构并对其特征（骨碎片中的骨陷窝数量及形状、面积）进行测量;并采用组间T检验法,以鹿骨为对照,比较鹿角、鹿角脱盘显微结构的差异。1.2氨基酸类成分指纹图谱研究采用柱前衍生化高效液相色谱法,以天冬氨酸等18种氨基酸对照,对鹿角药材的氨基酸类成分的指纹图谱进行分析。2主要化学成分分析2.1多糖类成分分析2.1.1总多糖含量测定分别采用苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法显色,以D-无水葡萄糖为对照,分光光度法,对样品中总多糖含量进行测定。2.1.2单糖种类与含量测定以甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、核糖、葡萄糖醛酸、盐酸氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖为对照,柱前衍生化-HPLC法,测定单糖的种类及含量。2.2磷脂类成分分析2.2.1总磷脂含量测定采用钼蓝显色剂显色,以磷酸二氢钾为对照,分光光度法测定样品中总磷脂的含量。2.2.2磷脂酰胆碱含量测定以磷脂酰胆碱为对照,HPLC法,测定样品中磷脂酰胆碱的含量。2.3水溶性蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝G-250显色,以牛血清白蛋白为对照,分光光度法,测定样品中水溶性蛋白质的含量。2.4氨基酸类成分种类与含量测定以天冬氨酸等18种氨基酸对照,采用柱前衍生化高效液相色谱法,对样品中18种氨基酸的含量进行测定。2.5核苷类成分种类与含量测定以尿苷、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶为对照,HPLC法,测定样品中四种核苷类成分的含量。2.6腐胺含量测定采用阳离子交换树脂柱层析分离,苯甲酰氯柱前衍生化,HPLC法,测定样品中腐胺成分的含量。3数据处理与统计学分析3.1聚类分析以测得的骨馅窝占骨碎片面积比及各化学成分含量为数据来源,应用SPSS 19.0统计软件,对样品进行系统聚类分析。3.2判别分析以测得的骨馅窝占骨碎片面积比及各化学成分含量为数据来源,应用SPSS 19.0统计软件,对样品进行判别分析。结果:1鹿角药材定性鉴别结果1.1显微鉴别研究结果鹿角脱盘中骨馅窝面积占骨碎片面积比为35.5%44.2%;鹿角粉末骨馅窝面积占骨碎片面积比为46.9%56.3%;鹿骨中骨馅窝面积占骨碎片面积比为71.9%。故骨馅窝面积占比由小到大依次为鹿角脱盘,鹿角,鹿骨。鹿角脱盘中骨馅窝长短经比例为2.04:12.38:1;鹿角中骨馅窝长短经比例为1.69:12.00:1;鹿骨中骨馅窝长短经比例为1.54:1。故骨馅窝长短径由大到小依次为鹿角脱盘,鹿角,鹿骨。鹿角与鹿角脱盘骨馅窝面积占骨碎片面积比及骨馅窝长短径比均具有显著性差异。1.2氨基酸类成分指纹图谱研究结果分析鹿角药材氨基酸类成分指纹图谱,共有21个峰,包含2个溶剂峰,18个已知峰和1个未知峰（3号为未知峰）。对其共有峰进行相似度计算,结果显示相似度均大于0.9。2主要化学成分分析结果2.1总多糖含量测定结果蒽酮-硫酸法测定结果,鹿角脱盘总多糖含量为0.53%1.6%,鹿角总多糖含量为0.37%0.42%,鹿骨总多糖含量为0.35%;苯酚-硫酸法测定结果,鹿角脱盘总多糖为0.34%0.96%,鹿角总多糖含量为0.060%0.098%,鹿骨总多糖含量为0.020%。两种多糖测定方法中,总多糖含量由高到低依次为:鹿角脱盘,鹿角,鹿骨。鹿角脱盘与鹿角两种方法测定的总多糖含量均具有显著性差异。蒽酮-硫酸法总多糖测定结果均高于苯酚-硫酸法测定结果。2.2单糖种类与含量测定结果鹿角多糖主要由甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、核糖、葡萄糖醛酸、盐酸氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖7种单糖组成,未检出D-半乳糖醛酸,其中葡萄糖含量最高,甘露糖其次,而核糖则含量较少。鹿角脱盘中七种单糖总含量为0.65mg·g-10.96 mg·g-1,单糖构成比为4.02:2.58:1:3.73:4.24:28.71:5.15;鹿角中七种单糖总含量为0.31 mg·g-10.40 mg·g-1,单糖构成比为4.41:4.1:1:3.51:3.56:6.21:4.56;鹿骨中七种单糖含量为0.14 mg·g-1,单糖构成比为4.82:2.65:1:3.73:2.05:5.25:3.43。七种单糖含量由高到低依次为:鹿角脱盘、鹿角、鹿骨,鹿角脱盘与鹿角测得的总单糖含量具有显著性差异,与总多糖含量测定结果一致。鹿角与鹿角脱盘中葡萄糖含量构成比最大且具有显著性差异,故可用葡萄糖含量标识总单糖及总多糖含量。2.3总磷脂含量测定结果鹿角中总磷脂含量为9.99 mg·g-121.6 mg·g-1,鹿角脱盘中总磷脂的含量为2.21 mg·g-17.47 mg·g-1,鹿骨中总磷脂含量为32.1 mg·g-1,总磷脂含量由高到低依次为:鹿骨,鹿角,鹿角脱盘。鹿角与鹿角脱盘的总磷脂含量存在显著性差异。2.4磷脂酰胆碱含量测定结果鹿角中磷脂酰胆碱含量为1.04 mg·g-12.15 mg·g-1,鹿角脱盘中磷脂酰胆碱的含量为0.18 mg·g-11.13 mg·g-1,鹿骨中磷脂酰胆碱含量为3.33mg·g-1。磷脂酰胆碱含量由高到低依次为:鹿骨,鹿角,鹿角脱盘,鹿角与鹿角脱盘磷脂酰胆碱含量存在显著性差异,测定结果与样品药材总磷脂含量测定结果一致,故可用磷脂酰胆碱含量测定结果标识总磷脂含量。2.5水溶性蛋白质含量测定结果鹿角水溶性蛋白质含量测定结果为0.20%0.30%,鹿角脱盘中水溶性蛋白质含量测定结果为0.27%0.43%,鹿骨中水溶性蛋白质的含量测定结果为0.22%。鹿角与鹿角脱盘中水溶性蛋白质含量没有明显差异。2.6氨基酸类成分种类与含量测定结果鹿角、鹿角脱盘和鹿骨中均检出10种游离氨基酸,鹿角游离氨基酸含量测定结果为0.62%0.86%,鹿角脱盘游离氨基酸含量测定结果为0.73%0.88%,鹿骨中游离氨基酸含量测定结果为0.8%。必需氨基酸仅检出一种,为赖氨酸,含量均超过0.1%。鹿角、鹿角脱盘和鹿骨中均检出水解氨基酸18种,鹿角水解氨基酸含量测定结果为26%30.84%,鹿角脱盘水解氨基酸含量测定结果为29.33%30.81%,鹿骨水解氨基酸含量测定结果为52.04%。其中Gly甘氨酸含量最高,均超过4.5%。必需氨基酸检测出8种,赖氨酸含量最高。鹿角与鹿角脱盘中氨基酸的种类与含量没有明显差异,与水溶性蛋白质含量测定结果一致。2.7核苷类成分种类与含量测定结果将鹿角与鹿角脱盘中的核苷类成分含量进行比较,鹿角四种核苷成分总含量为20.71μg·g-1117.1μg·g-1,鹿角脱盘四种核苷总含量为31.33μg·g-1137.9μg·g-1,鹿角四种核苷总含量为36.93μg·g-1。其中核苷类成分含量最高的为黄嘌呤与次黄嘌呤,尿苷含量最低。鹿角中的核苷类含量测定结果与鹿角脱盘无明显差异。2.8腐胺含量测定结果鹿角腐胺含量为7 mg·g-147.9 mg·g-1,鹿角脱盘腐胺含量为31.2 mg·g-151.9 mg·g-1,鹿骨腐胺含量为28.4 mg·g-1。将两者腐胺含量测定结果使用SPSS进行数据处理,无显著性差异,鹿角及鹿角脱盘腐胺含量无显著性差异。3数据处理与统计学分析结果3.1聚类分析结果以样品药材骨馅窝占骨碎片面积比以及八种化学成分（18种水解氨基酸含量,水溶性蛋白含量,总多糖含量,腐胺的含量,总磷脂含量,总单糖含量、核苷类成分含量及磷脂酰胆碱的含量）为数据来源,进行聚类分析,可将鹿角药材聚为一类,鹿角脱盘药材（除8#样品）聚为一类,鹿骨单独聚类。3.2判别分析结果样品药材骨馅窝占骨碎片面积比以及八种化学成分（18种水解氨基酸含量,水溶性蛋白含量,总多糖含量,腐胺的含量,总磷脂含量,总单糖含量、核苷类成分含量及磷脂酰胆碱的含量）典型判别函数为0.001,具有统计学意义。经逐步判别分析,取得了骨馅窝占骨碎片面积比;总水解氨基酸;水溶性蛋白质;总多糖;总单糖组份;腐胺;总磷脂;核苷类为典型判别式函数系数,以典型判别函数值进行计算,骨馅窝占骨碎片面积比及总水解氨基酸等六种化学成分特征值为:Y=0.004 X1+4.257 X2+186.871 X3+71.232 X4-179.25 X5+173.873 X6+3182.981 X7-183.713（Y>0,判为1类,Y<0,判为2类）。在九个样品中,总氨基酸等七种主成分的判别分析取得的判别模型可以将鹿角及鹿角脱盘样本完全区分开,该方法对初始分组样品中所有的样品进行了正确分类,判别分类效果较好。结论:1定性鉴别中,从显微鉴定角度分析,鹿角与鹿角脱盘具有显著性差异,骨馅窝占骨碎片面积比在35%45%范围内为鹿角脱盘,在45%60%范围内为鹿角,大于60%为鹿骨。以鹿骨为对照,骨化后骨馅窝占骨碎片面积比增大,鹿角较鹿角脱盘骨化程度大。测量骨馅窝占骨碎片面积比可为辨识鹿角及鹿角脱盘的重要依据,二者可通过显微测量进行鉴别。鹿角与鹿角脱盘的氨基酸指纹图谱上没有差异。2含量分析中,鹿角及鹿角脱盘在多糖类及磷脂类角度具有显著性差异:鹿角脱盘中总多糖含量高于鹿角中总多糖含量（可以葡萄糖含量来标识总多糖含量）;鹿角中总磷脂含量高于鹿角脱盘（可以磷脂酰胆碱含量来标识总磷脂含量）,可以此为鉴定依据对鹿角与鹿角脱盘进行区分。以鹿骨为对照,随着骨化程度的增大,总多糖含量减少、总磷脂含量增加。在水溶性蛋白质、氨基酸类、核苷类及腐胺角度不具显著性差异。3通过聚类分析和判别分析,取得了典型判别函数,可显著性的区分鹿角、鹿角脱盘和鹿骨,聚类判别效果很好。4临床应用时,以滋补作用用于临床时,鹿角与鹿角脱盘可以联合使用。以活血化瘀作用用于临床,治疗乳痈时,鹿角与鹿角脱盘需区分使用。