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目的:通过利用特异性甲基转移酶抑制剂5-氮杂2-脱氧胞苷分别作用于人胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、MKN-28,检测其增殖,细胞周期,凋亡率的变化,和抑癌基因RASSF1AmRNA的表达。以阐明5-氮杂2-脱氧胞苷对胃癌细胞增殖,细胞周期和凋亡率的影响,及同一抑癌基RASSF1A基因在不同分化程度的胃癌细胞系的表达情况。方法:体外培养人胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、MKN-28后,分别加入0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L不同浓度的5-Aza-CdR处理24h、48h、72h,用相差显微镜动态观察药物处理后的三种胃癌细胞形态学改变;MTT比色法测24h、48h、72h时间段的吸光度值,计算增殖抑制率,流式细胞仪检测5-Aza-CdR对胃癌细胞株生长周期及凋亡的影响,RT-PCR检测5-Aza-CdR处理前、后抑癌基因RASSF1AmRNA的表达。结果:(1)5-Aza-CdR作用于体外培养人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28后细胞增殖受到明显抑制,呈时间和浓度依赖性,与对照组相比,差异有显著性( P< 0.05 );(2)SGC-7901细胞周期分布发生变化,G0/G1期细胞数明显增多,胃癌细胞阻滞于G0/G1期,6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L浓度组与阴性对照组比较P<0.05,差异有显著性。MKN-28细胞亦阻滞在G0/G1期,6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L浓度组与阴性对照组比较P<0.05,差异有显著性。BGC-823生长周期无明显的变化。(3)5-Aza-CdR作用SGC-7901细胞24h、48h、72h后,72h各药物浓度组的凋亡率与阴性对照组比较及组间比较差异均有显著性( P< 0.05 ),24h、48h各药物浓度组与阴性对照组比较差异无显著性( P>0.05 )。MKN-28细胞72h后各药物浓度组与阴性对照组比较差异有显著性,25.6μmol/L浓度组与102.4μmol/L浓度组及各浓度组(0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L)之间差异有显著性( P< 0.05 )。24h、48h各药物浓度组与阴性对照组比较差异无显著性( P>0.05 )。BGC-823细胞72h各药物浓度组的凋亡率与阴性对照组比较及组间比较差异均有显著性( P< 0.05 ),24h、48h各药物浓度组与阴性对照组比较差异无显著性( P>0.05 );(4)RT-PCR检测人胃癌细胞株SGC-7901、MKN-28无RASSF1AmRNA表达,经5-Aza-CdR处理后基因重新表达,BGC-823处理前后RASSF1AmRNA均有表达。结论:1、RASSF1A抑癌基因沉默与胃癌的发生相关;2、5-Aza-CdR可以抑制细胞SGC-7901、MKN-28细胞的增殖,改变细胞周期,促进细胞凋亡。3、5-Aza-CdR对BGC-823细胞,明显抑制细胞增殖,并促进细胞凋亡,对生长周期无显著影响。4、5-Aza-CdR可能系通过消除RASSF1A基因抑癌基因的启动子甲基化状态,使其重新表达而抑制胃癌细胞的生长;并促进凋亡。