OPG/RANKL/RANK信号通路在PTH促进下颌骨牵张中的表达研究

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目的:研究 OPG/RANKL/RANK信号通路在甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促进下颌骨牵张成骨中新骨组织的影响,探索PTH调控兔下颌骨牵张成骨中的机制。  材料和方法:选取32只新西兰大耳白兔行单侧下颌骨牵张成骨术,以每天1mm的速度进行牵张,共牵张10天。实验组根据给予的PTH(1-34)剂量不同分为三组:A组隔日给予20μg,B组隔日给予40μg,C组隔日给予60μg。对照组D组给予生理盐水。各组实验动物定期抽血并在相应的固定期分别处死,取牵张侧的下颌骨冷冻保存,X线片影像学分析牵张侧新生成骨组织的情况,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定牵张期血清中核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κ B ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)水平的变化,利用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,QPCR)对比固定期时各实验组中牵张形成的新骨中骨保护素(osteoprotegerin,OPG),核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL),肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNFR-associated factor-6,TRAF-6),T细胞胞质核心因子1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic1,NFATc1)的mRNA表达量的差异。  结果:影像学观察中发现:A组、B组和C组的新生成骨组织的骨密度比对照组 D组高。血清中测定 RANKL的水平变化发现:牵张早期时 A组、B组和C组的值高于对照组 D组(P<0.05);对照组 D组在牵张晚期的值比牵张早期时要高(P<0.05)。血清中测定OPG的水平变化发现:牵张晚期时A组、B组的OPG表达量较对照组 D组的值高,各组中牵张晚期的OPG表达量显著高于牵张早期(P<0.05)。通过对比固定期各组中的OPG,RANKL,TRAF-6, NFATc1的mRNA表达量发现:A组、B组和C组的OPG mRNA表达量高于对照组D组(P<0.05)。A组、B组和C组的RANKL、TRAF-6的mRNA表达量低于对照组 D组(P<0.05),B组、C组的NFATc1的mRNA表达量低于对照组 D组(P<0.05),通过对比各组在各个时期(0周、1周、2周)的OPG,RANKL,TRAF-6, NFATc1的mRNA表达量发现:OPG的mRNA表达量在固定1周,2周时逐渐升高,A组、B组和C组升高的较为明显(P<0.05)。RANKL的mRNA表达量在固定1周,2周时逐渐降低(P<0.05),TRAF-6,NFATc1的mRNA在固定2周时降低(P<0.05),A组、B组和C组降低的较为明显(P<0.05)。  结论:1、在下颌骨牵张成骨的牵张期使用PTH(1-34)能够上调牵张早期RANKL的表达,加快了牵张成骨的骨重建,缩短了新骨生成的时期。2、OPG/RANKL/RANK信号通路在 PTH促进下颌骨牵张成骨的过程中可能具有一定的作用。
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