凋亡抑制因子Livin在人非小细胞肺癌中的表达及与Caspase-3、Ki-67相关性的实验研究

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目的研究凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein, IAP)Livin两种异构体Livinα、Livinβ在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织中的表达及临床意义,并分析Livin与磷酸化Caspase-3及增殖相关抗原Ki-67表达的相关性,初步探讨Livin的作用机制和在靶向治疗中应用的价值。方法(1)取NSCLC组织48例、癌旁肺组织29例和良性病变肺组织13例。肺癌患者中腺癌21例、鳞癌24例、大细胞肺癌3例;高分化6例、中分化29例、低分化10例、未分化3例;TNM临床分期为Ⅰ期11例、Ⅱ期18例、Ⅲ期14例和Ⅳ期5例;有淋巴结转移34例,无转移14例。(2)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述组织中Livin mRNA并同时用组织微阵列(TMA)结合免疫组织化学(IHC)SP法检测Livin蛋白、磷酸化Caspase-3和增殖相关抗原Ki-67的表达水平,并结合临床病理资料进行分析。结果(1)Livin在NSCLC组织、癌旁和良性病变肺组织中的表达阳性率分别为66.67%、6.90%和0.00%,差异具有显著性(P<0.05),Livin在NSCLC组织中有特异性的高表达。(2)Livin的两种异构体Livinα和Livinβ在NSCLC组织中多同时表达,两者在NSCLC组织中的表达无显著性差异(P>0.05),Livin mRNA和Livin蛋白的表达水平基本一致。(3)在淋巴结转移组,Livin的表达阳性率高于无转移组(P<0.05),而与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤大小、吸烟史、病理类型、分化水平和临床分期等临床特征均不相关(P>0.05)。(4)肺癌组织中Caspase-3蛋白的阳性表达率明显低于癌旁组织和良性病变组织(P<0.0125),并且Caspase-3的阳性表达与肺癌组织的分化程度有关(P<0.05),Livin的表达水平与Caspas-3呈负相关(r=-0.344,P=0.017)(5)肺癌组织中的Ki-67指数(LI)显著高于癌旁组织和良性病变肺组织(P<0.05),并且与肺癌组织的分化、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05),Livin的表达水平与Ki-67抗原呈正相关关系(r=0.602,P=0.000)。结论(1)Livin在NSCLC组织中有特异性的高表达,两种异构体基因在大多数NSCLC组织中同时表达,Livin mRNA和Livin蛋白的表达水平基本一致。(2)Livin的异常表达可能对NSCLC细胞的浸润、转移起重要作用。(3)Livin可能通过抑制凋亡过程中活化的Caspase-3蛋白而发挥抑制细胞凋亡的作用,并且Livin可能具有调节细胞有丝分裂,促进细胞增殖的作用,使NSCLC细胞呈现无限制的生长。(4)Livin有可能成为NSCLC靶向治疗新的靶点。
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