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本研究工作由两部分组成,第一部分是关于油菜BAC文库的构建以及相关克隆的筛选;第二部分是水稻BAC克隆BIBAC亚克隆的构建和相关克隆的筛选。细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库和人工双元染色体(binary bacterial artificial chromosome,BIBAC)文库在基因组的研究方面扮演了重要的角色。油菜是一种重要的农作物,具有很好的经济效益。通过油菜菜籽榨取的植物油不仅饱和脂肪酸的含量低而且还含有多种氨基酸、维生素,非常有益于人体的健康。本研究中,利用中国农科院油料作物研究所师家勤副研究员提供的油菜叶片,构建了一个油菜的BAC文库,用于相关基因的筛选和克隆。油菜BAC文库总计103,680个克隆,存放在270个384孔板中,文库平均插入片段大小为122.6kb,按油菜基因组1000M计算,覆盖油菜基因组12.5倍,空载率低于2%,无细胞器污染;利用连锁标记,对整个油菜BAC文库进行筛选,成功地筛选到4个阳性克隆,这些克隆携带了与油菜性状相关的基因。该部分工作对于通过遗传改良提高油菜的产量和品质具有特殊的意义。BAC载体不能用来直接转化植物,需借助BIBAC载体,通过BIBAC载体构建的亚克隆文库,能够直接转化植株。利用Sau3AI内切酶对水稻BAC文库中筛选出来的阳性克隆进行部分酶切,构建了一个水稻BIBAC亚克隆文库。该文库共768个克隆,平均插入片段大小为18kb,覆盖度为69倍。利用分子标记设计引物,对整个文库进行筛选,得到72个与水稻性状相关的阳性克隆基因,并进行了测序验证,这些克隆将直接用于水稻遗传改良。