奶牛乳房炎主要致病菌的分离鉴定及大肠杆菌噬菌体的生物学效应研究

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乳房炎(mastitis)又称为乳腺炎,是因为奶牛的乳房乳腺受到微生物因素、物理因素、化学因素、环境因素等其他因素刺激从而产生的一类炎症反应,直接给我国的奶农、乳制品企业和社会带来了巨大的直接经济损失。噬菌体是一类感染细菌等微生物的病毒。在近一个世纪,由于抗生素的迅速发展,一度使得人们对噬菌体研究探索处于停滞状态。近几十年,由于噬菌体治疗的优势,使人们对噬菌体的关注越来越多。本研究对患病奶牛乳汁中的主要致病菌进行分离,通过培养特点、染色镜检、形态观察及生化试验对其进行了鉴定。同时,对分离菌进行了药物敏感性试验。再以分离到的致病菌为宿主菌,通过双层琼脂平板法从环境污水中进行分离纯化对应宿主菌的噬菌体;对所获大肠杆菌噬菌体进行了效价测定、裂解谱的测定、最佳感染复数测定、温度稳定性测定、pH稳定性测定、紫外线稳定性测定及生长曲线测定。主要结果如下:1.采集石河子地区西部牧业、马连海、花园,这3个不同规模、不同饲养管理水平的奶牛场的临床型和隐性乳房炎奶样各10份,最终分离出21株大肠杆菌、10株链球菌及25株金黄色葡萄球菌。2.药敏试验结果显示:21株大肠杆菌对21种抗菌药物中的6种药物耐药率超过50%,同一菌株最多耐药15种,最少耐药5种,耐药6种以上菌株共占到61.90%。10株链球菌对氨苄青霉素、氟苯尼考高度敏感,而对链霉素、呋喃唑酮则表现出明显的耐药性,耐药率分别为50%、80%;耐药谱型表现为最多的菌株耐8种药物。25株金黄色葡萄球菌对阿莫西林、杆菌肽、复方新诺明的耐药率均在80%以上,对氟苯尼考和林可霉素却高度敏感,分别为100%和92%;耐药谱型分析发现耐药最多的菌株耐受9种药物,最少的耐受3种药物。3.最终得到大肠杆菌噬菌体5株,分别命名为Ecp1、Ecp3、Ecp5、Ecp16、Ecp17,并测定了效价和噬菌谱。同时,对5株噬菌体进行热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数、紫外线稳定性测定。
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