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启动子是调控基因表达重要的顺式作用元件,是分子生物学研究的热点。丝状真菌是重要的工业酶生产菌,其内源基因表达量非常高,可能存在着强的内源启动子,具有巨大的开发潜力。但到目前为止,已经开发出的丝状真菌的启动子较少。橡胶树白粉菌(Oidium heveae B.A.Steinmann)是专性寄生的丝状真菌,我们先前的研究工作基础首次报道了该病菌的基因组,从中发现多个疑似启动子。因此,本研究的目的是开发橡胶树白粉菌的内源启动子,为植物基因工程提供新的材料,同时也有助于从分子水平理解橡胶树白粉菌遗传组成与进化。本研究在橡胶树白粉菌HO-73基因组基础上,利用生物信息学软件Promoter Scan预测得到一个疑似启动子并命名为WY193。采用qRT-PCR技术测定WY193调控GUS基因的表达量,其表达量明显高于阳性对照CaMV 35S(35S)启动子,为35S的8.34倍。WY193在双子叶植物火龙果和烟草,以及单子叶植物椰子中均能驱动GUS基因进行表达。qRT-PCR测定WY193在双子叶植物火龙果调控GUS基因的表达量,是阳性对照35S启动子的4.46倍;qRT-PCR测定WY193在单子叶植物椰子中调控GUS基因的表达量,是阳性对照Ubiquitin(Ubi)启动子的3.70倍。利用ATMT法获得了WY193-hpaXm转基因烟草植株。对T1代转基因植株接种TMV,结果表明,与野生型三生烟和阳性对照35S-hpaXm转基因烟草相比,WY193-hpaXm转基因烟草植株对TMV抗性明显提高。WY193-hpaXm转基因烟草与野生型烟草相比平均病斑数减少64.40%,与阳性对照35S-hpaXm转基因烟草相比平均病斑数减少41.32%。qRT-PCR结果显示,未接种TMV的WY193-hpaXm转基因烟草中驱动hpaXm基因的表达量是未接种TMV的35S-hpaXm的2.87倍。而接种TMV的WY193-hpaXm转基因烟草中驱动hpaXm基因的表达量是未接种TMV的WY193-hpaXm的1.65倍。初步判断WY193启动子可能为TMV诱导启动子。为进一步确认WY193是否属于诱导型启动子,利用在线生物信息学软件PlantCARE分析WY193的顺式作用元件的组成,并通过稳定表达,利用盐等多个诱导因子,对T1代转基因烟草幼苗进行的相应诱导表达实验,初步确定TMV和盐分别是WY193启动子的诱导因子之一,即WY193可能是病原诱导或盐诱导类型的启动子。WY193启动子的成功预测、筛选和鉴定,为植物转基因工程提供了一个新的工具和选择。