龙血生肌膏对大鼠失神经支配创面神经肽P物质分泌和神经纤维再生影响的实验研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tom95800
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目的:  观察龙血生肌膏对大鼠失神经支配创面愈合的作用,并通过测定神经肽 P物质和神经纤维的含量,探讨龙血生肌膏促进失神经支配创面愈合的作用机理。  方法:  清洁级健康SD雄性成年大鼠168只,体重220~250g。完全随机法分成4组即龙血生肌膏组(A组)、生肌愈皮膏组(B组)、失神经创面组(C组)、正常创面组(D组)。将A、B、C三组大鼠的T11、T12、T13、L1、L2脊神经根离断,在全部大鼠背侧做一直径为1.5cm的圆形深度达肌膜下2mm的组织缺损深创面。A组创面以龙血生肌膏外用,每个创面0.1g;B组创面以生肌愈皮膏外用,每个创面0.1g;C组、D组创面均以凡士林外用,创面以纱布包扎,每日定时换药1次,于造模后1天、4天、7天、11天、15天、21天、28天七个时间点观察记录创面的愈合情况、计算创面面积和完全愈合时间并取材,制备组织切片进行HE常规组织学染色、GENMED神经纤维银染色和P物质的免疫组织化学染色。光镜下观察 HE染色各组创面组织形态学变化,成纤维细胞、胶原纤维形态及数量变化;光镜下观察 GENMED还原银染色各组神经纤维再生变化;光镜下观察免疫组化染色P物质的表达变化;对创面中成纤维细胞、再生神经纤维进行人工计数;用图像分析仪及分析软件分析各组创面胶原纤维面积,SP阳性表达面积。所得结果用SPSS17.0统计软件进行统计学处理。  结果:  ①创伤后的早期,龙血生肌膏组创面湿润,渗出较多,药物呈液体状均匀覆盖于创面上。其他组创面干燥,渗出少;愈合过程中,肉芽组织增生和再上皮化程度,龙血组和生肌组无明显差别,均优于失神经创面组,同时正常创面组愈合情况要优于失神经创面组。  ②创面愈合时间比较:龙血生肌膏组和生肌愈皮膏组的创面愈合时间无明显差别,均比非药物组(C组和D组)缩短,差异有统计学意义(P<0.05),失神经创面组愈合时间比正常创面组明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。  ③创面愈合率比较:除去第一天创面未见明显愈合外,其他时间点龙血生肌膏组和生肌愈皮膏组的创面愈合率无明显差异,均高于非药物组,差异有统计学意义(P<0.05),失神经创面组愈合率低于正常创面组,差异有统计学意义(P<0.05)。  ④HE形态学观察结果比较:HE染色结果显示,创面愈合过程中,龙血生肌膏组创面的炎细胞浸润、肉芽组织增生和成纤维细胞的数量均优于非药物组,与生肌愈皮膏组无明显差异。  ⑤创面神经纤维的再生比较:龙血生肌膏组和生肌愈皮膏组在第4、7、11天神经纤维大量再生,第15天达到高峰,与失神经创面组比较,差异有统计学意义。  ⑥创面P物质(SP)的表达比较:从SP表达的动态趋势来看龙血生肌膏和生肌愈皮膏组基本一致,较其他两组提前达到高峰。从SP表达量上观察,龙血生肌膏组明显高于其他3组。  结论:  第一,龙血生肌膏能促进失神经支配创面的愈合速度;第二,龙血生肌膏能促进失神经支配创面愈合过程中神经肽P物质的分泌和神经纤维的再生,龙血生肌膏的促愈合作用机理可能与促进神经肽P物质分泌和神经纤维再生有关。
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