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目的：
探讨人肾小管上皮(human kidney2，HK—2)细胞在缺氧及氧化损伤中急性肾损伤标志物中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase—associated lipocalin，NGAL)及肾损伤因子—1(kidney injury molecule—1，KIM—1)的表达及分泌特点，为寻找急性肾损伤特异性标志物提供实验依据。
方法：
分别采用不同剂量的抗霉素A(0.1umol/L、0.5umol/L、1umol/L、2umol/L)和H2O2(0.1mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L)处理24小时，用相同浓度的抗霉素A(0.1umol/L)及H2O2(0.1mmol/L)在不同时间点(0h、3h、6h、12h、24h、36h、48h)处理HK—2细胞，通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)检测NGAL、KIM—1 mRNA水平，ELISA法检测培养上清液中NGAL、KIM—1的分泌水平。
结果：
1.抗霉素A和H2O2可促进HK—2细胞分泌NGAL、KIM—1，且成剂量依赖性。
2.抗霉素A处理HK—2细胞6h—24h内，NGAL基因呈一过性表达增加，而KIM—1基因在处理24—48h内持续高水平表达；H2O2处理HK—2细胞表达分泌NGAL及KIM—1较抗霉素A干预后时间提前：3h—24h内，NGAL基因呈一过性表达增加，而KIM—1基因在处理12—48h内持续高水平表达。
3.抗霉素A给药组12h出现NGAL蛋白分泌高峰，较KIM—1早且显著；KIM—1在24h分泌持续增加；而H2O2给药组6—12h出现NGAL蛋白分泌高峰，KIM—1在12h后分泌持续增加。H2O2给药组较抗霉素A给药组蛋白分泌程度增高。两者蛋白分泌水平均较对照组明显增加(p<0.05)。
结论：
1.HK—2细胞缺氧及氧化损伤时异常表达NGAL及KIM—1。
2.NGAL基因和蛋白的表达高峰，较KIM—1早且显著；KIM—1基因和蛋白在12—24h后仍持续表达及分泌，较NGAL分泌及表达时间持久。两者均可作为急性肾损伤早期诊断的指标，而KIM—1可作为动态监测急性肾功能损伤的指标。