包含肝微粒体或酵母表达的重组人源CYP450亚型酶的CYP450体外代谢系统是重要的一类药物代谢研究模型,此模型在研究药物的I相代谢反应时具有简便、快速、高效的特点。其对确定药物代谢的产物类型、产物生成途径以及酶促动力学参数均有重要意义。此外体外代谢系统还可以用来研究药物与CYP450之间的关系,通过确立参与药物代谢的CYP450亚型酶以及被药物抑制的CYP450亚型酶种类,可以用来评价药物联合使用时的代谢性相互作用,对于评价药物的安全性和指导临床用药均起着重要作用。本研究优化了肝微粒体制备方法、体外代谢系统的体系组成以及代谢反应后样品萃取方法；并应用CYP450体外代谢系统对三种可能成为候选药物的新化合物：没食子酸冰片酯(GBE)、丁香酸冰片酯(SBE)及原儿茶酸冰片酯(PBE)的代谢及产物类型进行了研究,在此过程中建立和优化了HPLC及质谱分析检测方法；同时也研究了这些化合物与CYP450的关系。在代谢实验中对三种化合物分别在人肝、鼠肝、狗肝和猴肝微粒体中生成的代谢产物进行了比较,除SBE在鼠肝微粒体中代谢有一个特有产物外,每种化合物在各微粒体中代谢产物类型一致,但生成的趋势不一。此结果为后期动物实验中实验动物的选择及结果的分析提供一定的参考作用。对比各化合物在人肝和鼠肝微粒体中的代谢动力学参数异同,由微粒体对各冰片酯的总的内在清除率(CLint)可以发现三种药物在鼠肝中的清除率均较在人肝中的大数倍。从产物的质谱检测结果可以推知,药物经肝微粒体代谢产物生成的途径主要是单加氧反应,但SBE的代谢产物有两个可能除了发生了单加氧反应外还发生了去甲基反应。在药物与CYP的关系研究方面,通过在反应体系中加入不同的CYP亚型酶特异性抑制剂,研究了参与三种候选药物代谢的主要CYP亚型,通过统计分析表明体系中加入CYP2C8的抑制剂槲皮素后,三种化合物的各个产物生成量都有所减少,由于三个候选药物结构类似,推断CYP2C8均参与了三种化合物的代谢。这些候选药物如果进入临床应避免与抑制CYP2C8的药物连用,这样可以避免因药物清除减慢而可能出现的不良反应。通过荧光探针底物和荧光扫描技术相结合研究了这些酚酸冰片酯对6种主要CYP酶的抑制,结果表明GBE对3A4及2C9的抑制最强。而SBE和PBE分别对2C19和和2C9的抑制最强。如果三种候选药物上市后与以上对应的被其抑制的CYP亚型参与代谢的药物共同服用,就有可能在联合用药时产生药物药物相互作用,影响相应药物的清除。本研究成功地应用CYP450体外代谢系统对三种酚酸冰片酯类化合物的代谢进行了研究,所得到的研究结果可以帮助更进一步了解三种化合物的代谢途径和作用机制,对加快药物的后续开发过程以至于之后进入临床后的联合用药的药物安全性指导均提供了重要的支持。