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目的探讨生酮饮食对三氟乙醚诱导新生大鼠反复惊厥的干预作用及分子机制。方法日龄7天(P7)的Sprague-Dawley(SD)大鼠共40只,随机分为对照组(NS组)和惊厥组(RS组),每组各20只。适应性喂养一天后,RS组大鼠吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,反复诱导惊厥持续30min,每日一次,同样方法连续诱导8天;NS组同样操作但不吸入三氟乙醚。在P21依据是否给予生酮饮食(KD)干预,每组大鼠再随机分为两组,即未惊厥普通饮食组(NS+ND)、未惊厥生酮饮食组(NS+KD)、惊厥普通饮食组(RS+ND)、惊厥生酮饮食组(RS+KD),每组各10只。NS+ND组和RS+ND组大鼠给予普通饮食,NS+KD组和RS+KD组大鼠给予生酮饮食,饮食干预三周。在KD实行当日、7日、21日每组大鼠尾静脉采血对其血糖和血酮值进行监测。饮食干预期间每隔三天测量并记录各组大鼠的体重。在P28、P35分别进行两次神经行为测定包括攀金属网实验、握力实验、负向趋地反应实验;P36行旷场实验。P43每组各随机取6只大鼠共24只,断头取大脑皮质及海马,用免疫印迹法检测各组大鼠大脑皮质及海马ZnT-3、PRG-1、bcl-2蛋白的表达。每组各取4只大鼠共16只采用Timm染色法观测各组大鼠海马区苔藓纤维发芽情况。结果1、对体重的影响:KD干预三天后,KD组(NS+KD组、RS+KD组)较相应的ND组(NS+ND组、RS+ND组)体重显著降低(P﹤0.05),这种状态一直持续到实验结束。并且随着大鼠年龄的增长,ND组大鼠的体重较前逐步增长,而KD组大鼠体重较前逐步的降低。2、神经行为实验:(1)攀金属网实验显示:随着日龄的增长,各组大鼠较前攀金属网所需时间均缩短。组间比较KD组较相应的ND组攀金属网所需时间显著缩短(P﹤0.05)。.RS组(RS+ND组与RS+KD组)较相应的NS组(NS+ND组、NS+KD组)攀金属网所需时间在P28显著增加(P﹤0.05),而在P35无显著性差异(P>0.05)。(2)握力实验显示:随着日龄的增长,各组大鼠较前握力所维持的时间均缩短。KD组较较相应的ND组握力维持时间延长(P﹤0.05),RS组较相应的NS组握力维持时间缩短(P﹤0.05)。(3)负向趋地反应实验显示:各组大鼠不同日龄负向趋地反应时间无显著性差异(P﹥0.05)。(4)旷场实验显示:四组大鼠旷场实验中延迟时间无显著性差异(P﹥0.05);RS+KD组比RS+ND组开场得分显著降低(P﹤0.05);RS+ND组比NS+ND组修饰行为显著增加(P<0.05)。3、Neo-Timm染色:在CA3区,RS+ND组苔藓纤维发芽程度明显高于NS+ND组(P﹤0.05),RS+KD组苔藓纤维发芽程度明显低于RS+ND组(P﹤0.05),NS+ND组和NS+KD组Timm’s颗粒分布无明显差异(P﹥0.05);在齿状回,RS+ND组苔藓纤维发芽程度明显高于NS+ND组(P﹤0.05),而RS+KD组与RS+ND组、NS+KD组与NS+ND组Timm’s颗粒分布无明显差异(P﹥0.05)。4、免疫印迹:(1)RS+ND组与NS+ND组相比,大脑皮质及海马ZnT-3的表达显著增高(P﹤0.05);RS+KD组与RS+ND组相比,ZnT-3的表达显著降低(P﹤0.05);NS+KD组与NS+ND组相比,ZnT-3的表达显著降低(P﹤0.05)。(2)RS+ND组与NS+ND组相比,大脑皮质及海马PRG-1的表达显著增高(P﹤0.05);RS+KD组与RS+ND组相比,PRG-1的表达显著降低(P﹤0.05);NS+KD组与NS+ND组相比,PRG-1的表达无显著性差异(P﹥0.05)。(3)RS+ND组与NS+ND组相比,大脑皮质及海马中bcl-2的表达显著降低(P﹤0.05);RS+KD组与RS+ND组相比,bcl-2的表达显著增高(P﹤0.05);NS+KD组与NS+ND组相比,bcl-2的表达无显著性差异(P﹥0.05)。结论1、三氟乙醚诱导新生期大鼠反复长程惊厥导致神经行为的损伤。造成海马苔藓纤维异常发芽,同时使苔藓纤维发芽相关分子ZnT-3、PRG-1表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。2、惊厥后采用生酮饮食进行干预,能抑制大鼠体重增长。改善大鼠的神经行为,能减轻惊厥后海马苔藓纤维异常发芽程度,同时明显下调苔藓纤维发芽相关分子ZnT-3、PRG-1的表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。3、生酮饮食可能通过ZnT-3/PRG-1通路抑制异常的海马苔藓纤维发芽,抑制神经细胞的凋亡,发挥脑保护作用。