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香叶醇存在于很多植物性精油中,是玫瑰香气的主要挥发性成分,也是重要的萜烯类香气成分。香叶醇为单萜类物质,通过甲戊二羟酸途径进行生物合成,香叶醇/香茅醇乙酰转移酶(Geraniol acetyl transferase,AAT)以乙酰辅酶A为乙酰基供体,主要以香叶醇/香茅醇为底物,催化乙酸香叶酯和乙酸香茅酯的合成。‘月月粉’(Rose chinensis‘Pallida’)是中国古老月季,对现代月季育成有重要作用,具有大多数现代月季没有的香味。本研究以中国古老月季‘月月粉’为研究对象,采用同源克隆结合‘月月粉’全基因组序列,获得了RcAAT基因全长,采用实时荧光定量PCR对该基因在‘月月粉’不同部位和不同发育时期的表达进行分析,利用病毒诱导沉默系统(VIGS),完成RcAAT在植株内的瞬时功能表达。具体研究结果如下:(1)根据GenBank已发表其它物种的香叶醇乙酰基转移酶基因,获取序列并设计引物,扩增出长度为188bp的片段,结合‘月月粉’全基因组序列和PCR扩增,获得了RcAAT基因的cDNA全长,对其进行生物信息分析,结果显示RcAAT是一个1641bp的核苷酸序列,其核苷酸序列包含1个68bp的5′-UTR,1个1371bp的OFR,1个202bp的3′-UTR。该基因在69~71位为起始密码子ATG,下游有同框终止密码子TAA和polyA尾。氨基酸同源序列对比发现,月季RcAAT与玫瑰和草莓具有较高的同源性。其中与玫瑰的同源性为87%,与草莓同源性为67%。(2)采用实时荧光定量PCR对RcAAT在‘月月粉’不同发育时期和不同组织部位的表达进行分析。研究表明,在不同组织部位中RcAAT表达量差异显著,茎的表达量最低,雄蕊表达量最高;在花朵不同发育时期中,RcAAT表达量随着花瓣开放程度表达量逐渐增加,在花蕾期几乎无表达,在盛开期花瓣表达量到达顶峰,而后下降。(3)构建病毒诱导的基因沉默载体RcAAT-TRV2。‘月月粉’顶芽置于菌液中抽真空完成侵染,将侵染枝条嫁接到砧木上,4-5周后嫁接芽开花,利用气象色谱质谱联用仪(GC/MS),对成功沉默RcAAT的‘月月粉’花瓣进行花香成分分析。结果表明,香叶醇及乙酸香叶酯等含量被相应的降低,表明RcAAT基因主要参与了香叶醇和乙酸香叶酯的合成。