背景与目的:过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)是儿童最常见的且有一定自限性的毛细血管和细小血管炎,除皮肤紫癜外,还可引起腹痛、关节炎甚至肾脏的损害,其中过敏性紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)是最严重的并发症,与过敏性紫癜病情的进展及预后关系最为密切。该病病因尚未完全明确,认为与遗传、微生物感染、药物、食物等有关,随着对人类基因学研究的不断探索,目前已发现多种基因的遗传多态性与HSP相关。HSP的发病近年呈上升趋势,影响患者的健康和生活质量,有必要对其病因及发病机制进行深入研究。高迁移率族蛋白(High mobility group protein,HMGB1)被认为是晚期重要的炎症介质,具有广泛的免疫调节作用,并与IL-6、TNF-a等炎症因子相关作用参与炎症的级联放大反应,其基因多态性与多种自身免疫性炎症疾病相关,但在HSP中尚未见报道。本研究旨在探讨HMGB1基因多态性与儿童HSP易感性的关系,筛查与疾病相关的SNP位点,并通过ELISA实验进一步从分子水平研究HMGB1在发病机制中起到的作用,为深入理解HSP的遗传易感性、阐明HSP的发病机制、疾病的风险预测提供理论依据,为临床诊疗提供新的思路。方法与资料:1、外周血样本选择。采用病例-对照研究设计,自2015年3月至2016年8月间,在济宁市第一人民医院病房及门诊确诊为HSP的160例患儿为HSP组,同期我院体检的82例健康儿童为对照组。2、标签单核苷酸多态性的筛选。HMGB1基因的转录起始位点上下游3-10kb范围内,通过HMGB1基因的连锁不平衡结构图,以及查阅前期文献,最终选择标签SNP(tagging SNP,tag SNP):rs2249825,rs1045411,rs1412125。3、引物设计及测序。测序的范围包括4个外显子以及包含在内含子中的两个标签SNP,共设计6对引物。应用ABI 3730测序仪对HMGB1基因的tag SNP进行测序分型,并根据每个碱基的高峰进行基因型的自行判读。4、统计分析。对标签SNP及筛查到的有意义的SNP的基因型频率、等位基因频率进行H-W平衡检验及统计分析,筛查与HSP/HSPN相关的SNP。5、血清样本选择。从160例HSP患儿中随机选择60例为HSP组,同期我院体检的59例健康儿童为对照组。6、血浆HMGB1、IL-6、INF-a的测定。取采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测两组HMGB1、IL-6、INF-a的水平。7、统计分析。T检验分析HMGB1、IL-6、INF-a在两组间的差异,并做HMGB1与IL-6、INF-a间的pearson相关性分析。结果:1、HMGB1基因的rs3742305位点,CC基因型在HSP组低于对照组,差异有统计学意(P=0.014<0.05),G→C突变与HSP相关,C等位基因频率在两组间无显著性差异(P>0.05),且在HSPN组与对照组中亦未发现基因型与等位基因频率存在统计学差异(P>0.05),该位点多态性可能与HSPN的发生无关;rs2249825,rs1045411,rs1412125位点基因型和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05),与HSP/HSPN的发生无相关性。2、HSP组血浆HMGB1、IL-6及INF-a浓度高于对照组并有统计学差异(P<0.05),HMGB1与IL-6的表达、HMGB1与INF-a的表达均呈正相关。结论:1、本研究结果表明,在山东鲁西南地区患儿中,HMGB1基因rs3742305位点CC基因型与HSP相关,可能是其发病的保护因素,而该位点的基因多态性与HSPN的发生可能无关。但未发现rs2249825、rs1045411和rs1412125的基因多态性与HSP/HSPN的相关性。2、HMGB1在HSP疾病的炎症反应过程中起到重要作用,它可上调炎症因子IL-6、TNF-a的表达,可能促进了疾病的发生发展。