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目的检测替加环素对我院2012年临床分离多重耐药细菌的体外抗菌活性,为替加环素的临床应用提供实验室依据；评估不同敏感性试验方法检测替加环素对鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌的体外药敏结果,为临床微生物实验室选择替加环素的体外药敏试验方法提供参考。方法回顾性分析我院2012年临床分离的2264株常见多重耐药细菌,采用Vitek-2compact细菌分析系统检测替加环素的体外敏感性,分析不同判定标准下替加环素的药敏结果,数据分析采用WHONET5.4软件；选取2012年1月至3月临床感染患者分离的50株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌和49株肺炎克雷伯菌,采用微量肉汤稀释法、Vitek-2法、MIC Test Strip (MTS)法及纸片扩散法分别检测替加环素对二种细菌的敏感性,并以微量肉汤稀释法为参考方法,采用美国食品药品监督管理局(FDA)及欧洲抗生素敏感性试验委员会(EUCAST)两种判定标准,评估Vitek-2法、MTS法及纸片扩散法与参考方法的一致性。结果(1)参照FDA/EUCAST判定标准,替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、耐万古霉素肠球菌(VRE)的敏感率均为100%,MRSA和MRCNS的替加环素MIC50/90为0.125μg/ml,均低于万古霉素及利奈唑胺。(2)参照FDA/EUCAST判定标准,替加环素对产ESBLs大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的敏感率分别为99.8%/98.4%、86.6%/67.8%、69.0%/35.7%。铜绿假单胞菌对替加环素MIC50/90均为8Pg/ml。(3)50株CRAB采用微量肉汤稀释法、Vitek-2法、MTS法测得替加环素MICs0/90分别为1μg/ml和2μg/ml、2μg/ml和4μg/m1.5μg/ml和3μg/ml,49株肺炎克雷伯菌采用微量肉汤稀释法检测替加环素MICso/90分别为1μg/ml和2μg/ml, Vitek-2法、MTS法测得MICso/90均为0.5μg/ml和1μg/ml。参照FDA/EUCAST判定标准,CRAB采用微量肉汤稀释法、Vitek-2法、MTS法检测替加环素敏感率分别为94.0%/70.0%、68.0%/28.0%、90.0%/44.0%,肺炎克雷伯菌对替加环素敏感率分别为91.8%/75.5%、91.8%/91.8%、91.8%/91.8%。纸片法采用四种不同判定标准,CRAB对替加环素敏感率为0～96.0%,肺炎克雷伯菌对替加环素敏感率为63.3%～95.9%。(4)采用FDA判定标准,Vitek-2法和MTS法的检测结果与参考方法的分类一致率(CA)均高于EUCAST判定标准下的检测结果；Vitek-2法检测CRAB和肺炎克雷伯菌与参考方法的基本一致率(EA)分别为94.0%、95.9%,MTS法检测CRAB和肺炎克雷伯菌与参考方法的EA为92.0%、83.7%；两种方法均未出现重大误差(VME)。(5)对于耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,纸片法采用折点≥14mm/≤10mm,参考方法采用FDA判断标准,两者一致性最好,CA最高(94.0%),小误差(mE)最低(2.0%),出现2株VME。对于肺炎克雷伯菌,纸片法采用折点≥16mm/≤12mm,参考方法采用FDA判断标准,两者一致性最好,CA最高(98.0%),mE最低(2.0%),未出现VME。结论替加环素对除铜绿假单胞菌外的临床常见多重耐药菌均有良好的抗菌活性,对革兰阳性球菌抗菌活性最强。FDA判定标准比EUCAST标准更适用于临床替加环素药敏结果判定,故建议实验室采用FDA判定标准。不同方法检测替加环素药敏结果不同,对于耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,MTS法与微量肉汤稀释法的一致性高于Vitek-2法；对于肺炎克雷伯菌,Vitek-2法与微量肉汤稀释法的一致性高于MTS法；纸片扩散法判定折点需根据不同的细菌做相应的调整,对于耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,以敏感≥14mm/耐药≤10mm为折点,与微量肉汤稀释法的一致性最好；对于肺炎克雷伯菌,以敏感≥16mm/耐药≤12mm为折点,与微量肉汤稀释法的一致性最好。