复制缺陷型重组腺病毒相关质粒的构建的研究

来源 :中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong488
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该课题的研究目标就是构建复制缺陷型重组腺病毒.在构建重组腺病毒之前,我们对使用脂质体转染肺癌细胞进行了初步研究.实验时,以报道基因β-半乳糖苷酶为目的基因,以肺腺癌细胞株为靶细胞,使用阳离子脂质体介导基因转染.结果说明在现有条件下,使用优化过的转染条件,转染SPCA-1细胞的最高效率为12.5﹪,A549细胞的转染效率则在职﹪以下.总体而言,这一转染效率是不能满足基因治疗的要求的,但进一步提高阳离子脂质体介导的基因转染效率存在较大困难.选择腺病毒作为载体是有可能解决这一难题的办法之一.所以我们继续进行了下列实验.第一部分,穿梭质粒pAdCEAct-s、pAdEC-ct和pAdCMV-EC-ct的构建.第二部分,重组质粒pAdCMV-EC-ct-R和pAdCMV-ct-R的构建及表达.总之,我们到目前已构建了复制缺陷型重组腺病毒的相关重组质粒pAdCMV-EC-ct-R和pAdCMV-ct-R,为进一步完成复制缺陷型重组腺病毒的构建打下了基础.
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