从HPA、HPT轴探讨金匮肾气丸与六味地黄丸补肾作用机制的差异

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目的通过建立糖皮质激素肾阳虚小鼠模型、肾阴虚小鼠模型,分别探讨金匮肾气丸对肾阳虚模型小鼠、六味地黄丸对肾阴虚模型小鼠的补肾作用,并从下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴、下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴的角度探讨金匮肾气丸温补肾阳及六味地黄丸滋补肾阴的作用机理,探求该两方补肾作用机制的差异。方法采用糖皮质激素灌胃建立肾阳虚小鼠模型及肾阴虚小鼠模型;观察模型小鼠生存状态,测定各组模型小鼠体质量变化,酶联免疫法(ELISA)测定血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量;放射免疫法检测HPA轴中血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor.)含量,HPT轴中血清甲状腺激素(TSH)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)含量,计算各组小鼠肾上腺、甲状腺指数,光学显微镜下观察肾上腺、甲状腺组织形态学改变。结果1、25 mg/kg氢化可的松注射液灌胃10天建立肾阳虚小鼠模型,模型小鼠出现精神倦怠、活动减少、反应迟钝、肢尾冷、蜷曲拱背、皮毛无光泽、不欲饮食、大便稀溏等症状,随给药时间延长,上述症状逐渐加重,体质量降低(P<0.01),血浆中cAMP含量降低(P<0.01),cGMP含量升高(P<0.01)。2、50 mg/kg氢化可的松注射液灌胃4天可建立肾阴虚小鼠模型,模型小鼠出现烦躁、易激惹、拱背扎堆、毛发枯槁易脱落、大便干结、饮食增多等症状,随给药时间延长,上述症状逐渐加重,体质量降低(P<0.01),血浆中cAMP含量升高(P<0.01),cGMP含量降低(P<0.01)。3、金匮肾气丸可升高肾阳虚模型小鼠HPA轴中血清ACTH、Cor.含量,HPT轴中血清TSH、T3、T4含量(P<0.01),升高肾上腺指数及甲状腺指数(P<0.05),修复受损的肾上腺和甲状腺组织。4、六味地黄丸可降低肾阴虚模型小鼠HPA轴中血清ACTH、Cor.含量,HPT轴中血清TSH、T3、T4含量(P<0.01,P<0.05),升高肾上腺指数及甲状腺指数(P<0.05),修复受损的肾上腺和甲状腺组织。结论血浆中cAMP含量、cGMP含量的变化可作为考察糖皮质激素肾阳虚、肾阴虚模型成功的重要指标之一。这为肾阳虚、肾阴虚小鼠模型的建立及评价,探讨肾阳虚证、肾阴虚证的本质提供了研究基础。金匮肾气丸改善肾阳虚证的作用机制与其升高HPA轴中血清ACTH、Cor.的含量、HPT轴中血清TSH、T3、T4的含量有关;六味地黄丸改善肾阴虚证的作用机制则反之。这为阐明金匮肾气丸、六味地黄丸的补肾机制,提高金匮肾气丸、六味地黄丸的临床治疗水平提供了一定的科学依据。
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