大豆反义fad2-1基因转化农杆菌和遗传多样性RAPD分析

来源 :河南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaopp1920
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究旨在:Ⅰ.克隆大豆油酸脱饱和酶基因fad2-1及其片段,构建其反义基因表达载体,转化根癌农杆菌LBA4404,获得工程菌,为通过农杆菌介导方法培育大豆新品种提供理论和技术依据,而且为进一步探讨反义RNA的全长序列或是片段可以有效的发挥抑制作用提供一定的实验基础。Ⅱ.建立河南部分栽培大豆遗传多样性的RAPD分子标记体系,为其育种和品种鉴定提供了理论和技术依据。研究取得的主要结果如下: (1)根据NCBI报道的大豆fad2-1基因序列,设计出两对有效的引物,用PCR方法从大豆基因组DNA中分离克隆了fad2-1基因1196bp的全长序列和656bp的片段; (2)将fad2-1基因的全长序列和片段用SalⅠ和BamHⅠ双酶切后反向插入经SalⅠ和BamHⅠ双酶切的pBt植物表达载体中,构建了含有反义基因的植物表达载体; (3)采用冻融法将含有反义fad2-1基因的全长序列和片段的植物表达载体转入农杆菌LBA4404,经过抗性筛选、双酶切分析和PCR鉴定,获得了农杆菌LBA4404工程菌; (4)建立了适合河南大豆遗传多样性的RAPD分析体系;并用该体系从73种随机引物,经过二次筛选,得到12种随机引物扩增出了较稳定的DNA条带,大小在0.2~5Kb之间;每种引物扩增出的条带数在4~9条之间,共计扩增出67条带,其中多态性条带51条,多态性指数为76.12%。利用SPSS11.0软件进行统计分析和聚类分析的结果表明所有样品的相似系数都在0.528和0.776之间,平均相似系数为0.6416,并得到了它们的聚类树状图。通过对该图分析可知:这些材料可聚成3组,各组内品种(系)体现了一定的相关性。
其他文献
本文对叶氏隆肛蛙和太行隆肛蛙成体和蝌蚪的消化道进行了解剖学、组织学和免疫组织化学方面的研究。结果表明:叶氏隆肛蛙和太行隆肛蛙的消化道在解剖学和组织学方面的特征很相
在麻省理工学院在2007年提出磁耦合谐振式无线能量传输(Wireless Power Transfer)技术之后,无线能量传输技术在近年来受到了广泛的关注。相较于有线电能传输,它具有更灵活、更安全和更加可靠等优点。然而这种磁耦合谐振式无线能量传输技术依赖于收发线圈间的严格对准,因此为了更好的投入实际应用需要一种可以实现稳定高效的全向无线能量传输技术。本文将以危险工业环境的微纳无线传感系统为应用背景
学位
成年哺乳动物中枢神经系统(CNS)损伤,常导致神经元的死亡和轴突不可逆性退化,再生困难,众多的试验性研究用来促进损伤的神经元存活和轴突再生。视神经、视网膜是脑的衍生物,属于C
LED照明的广泛应用带动了LED玻璃灯杯的发展,同时也对LED玻璃灯杯的产量以及质量一致性提出了更高的要求。但是,目前在许多企业的LED玻璃灯杯生产线上,瑕疵检测还是完全依赖
学位
本文通过对荣华二采区10
期刊
根据《甘肃省林业和草原局关于开展弘扬八步沙精神·庆祝新中国成立70周年生态文化大赛活动的通知》安排,省林草局于2019年6月起组织开展了弘扬八步沙精神·庆祝新中国成立70
期刊
学位
物理是自然科学中的一门基础性学科,与其他学科相比有着很强的实践性,物理实验教学是物理教学的一个重要组成部分。本文针对中学物理实验教学中存在的问题进行分析、思考,围绕转
川崎市位于东京正南,人口130万.19世纪晚期日本向西方开放的时候,川崎只是一个小镇.从那以后,多种工业包括钢铁、石油精炼、石化、水泥、造纸、动力生产和冶金等,被引进到这