【摘 要】
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该研究首先根据色氨酸脱羧酶家族蛋白质一级结构的保守氨基酸序列HKW 设计了四个上游的3个末端锚定引物组合, 利用范军等人建立的定向差异显示技术对由水稻健叶和稻瘟菌非亲
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该研究首先根据色氨酸脱羧酶家族蛋白质一级结构的保守氨基酸序列HKW 设计了四个上游的3个末端锚定引物组合, 利用范军等人建立的定向差异显示技术对由水稻健叶和稻瘟菌非亲和性小种接种稻叶mRNA反转录而来的cDNA进行扩增,经过放射自显影、回收、克隆和鉴定后,分离得到8个含有差示片段的cDNA克隆.并试图进一步改进定向差异显示技术, 提高PCR反应的特异性,同时减少人为误差,以使差异显示PCR产物靶向色氨酸脱羧酶.利用改进的体系再次分析了稻瘟菌非亲和性小种接种的水稻稻叶中转录物的变化,在抗病组合中分离出了20个诱导表达的cDNA条带,对照健叶中分离出了9个在稻瘟菌侵染中被抑制表达的cDNA条带.
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