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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的高度接触性传染性疾病,其主要特征是妊娠母猪的繁殖障碍和各年龄阶段猪的呼吸系统疾病,给养猪业带来了巨大的经济损失。PRRSV的入侵机制一直是研究热点,包括许多对其宿主和受体的研究。猪是PRRSV唯一的天然宿主。分化的单核细胞、尤其是肺泡巨噬细胞,是其主要的宿主细胞。大量研究已证实,PRRSV是通过宿主细胞表面的受体分子介导入侵的。目前国内外已鉴定多种与PRRSV入侵相关受体,如唾液酸粘附素(Sialoadhesin,Sn)、CD163(Cluster of differentiation163)和硫酸乙酰肝素(Heparin sulphate,HS)等,它们共同协助完成PRRSV的入侵和复制增殖过程。其中,唾液酸粘附素(Sn),也被称作CD169或Siglec-1(sialic acid binding immunoglobulin-type lectin-1),是在巨噬细胞表面特异表达的凝集素并在PRRSV感染靶细胞的吸附和内吞过程中发挥着重要作用。进一步研究发现,Sn的V-set Ig-like结构域在PRRSV入侵过程中起主要作用,但目前其结构生物学机制尚不清楚。为了探究PRRSV受体Sn的结构信息及其在病毒入侵过程中所发挥的作用,本试验首先采用毕氏酵母表达系统,成功克隆及表达了猪源Sn V-set Ig-like结构域重组蛋白。但因其表达量过低,不利于其结构生物学研究,因此继续采用昆虫表达系统(果蝇胚胎Drosophila Schneider-2,S2细胞)克隆表达了猪源Sn V-set Ig-like结构域重组蛋白,并对其进行了western blotting检测、质谱检测及镍柱纯化等试验,结晶并预测了其空间结构。最终得到的重组蛋白序列与Sn V-set Ig-like结构域目的蛋白序列100%匹配,具有生物学活性,纯度高达99%。这些结果为研究Sn V-set Ig-like结构域结构,揭示其参与病毒相互作用的重要作用位点和关键氨基酸,促进理解其在PRRSV入侵过程中的作用,并为深入探究PRRSV入侵机制奠定了分子基础,同时为PRRSV疫苗及临床药物的研发提供了结构生物学理论依据。