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目的在如今恶性肿瘤严重威胁人们的健康,加之其发病率以及死亡率逐年递增,在这种形式下,人们越来越注重恶性肿瘤的研究及探讨,作为消化道常见恶性肿瘤的结直肠癌,这种趋势更加凸显。现代社会节奏加快,饮食习惯也随之改变,结直肠癌的发病率也随之增加。至于结直肠癌患者的预后,与结直肠癌对其肿瘤周边组织的侵袭和浸润以及结直肠癌的远处转移密切相关。随着基础研究的慢慢深入,高迁移率族蛋白B1由于其高度保守的进化、丰富的含量以及作为一种几乎100%存在真核细胞内的蛋白渐渐被人们所熟知,在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,HMGB1具有快速的迁移率,这也是高迁移率族蛋白B1名字由来的原因。从目前的研究中我们发现高迁移率族蛋白B1在基因层面担任促肿瘤的关键角色,在肿瘤的发生发展、浸润侵袭和转移等生物学效用方面发挥着重要的作用。目前研究显示与人类相关的多种恶性肿瘤中HMGB1均呈现高表达状态,这与肿瘤的发生发展及浸润转移等多种生物学效应密切相关。在我们的此研究中,主要目的为首先利用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默高迁移率组蛋白B1的基因表达,探究其表达被慢病毒介导的RNA干扰沉默后结直肠癌体外细胞株Lovo中高迁移率组蛋白B1的基因表达对lovo细胞的生长增殖、侵袭及转移等相关生物学效应的抑制作用。方法高迁移率组蛋白B1基因表达可通过慢病毒介导的小分子RNA干扰技术进行有效的干扰;利用WB法检测高迁移率组蛋白B1基因成功干扰表达后Lovo细胞中高迁移率组蛋白B1相对应的表达含量,反转录聚合酶链反应检测高迁移率组蛋白B1基因成功干扰表达后Lovo细胞中高迁移率组蛋白B1 m RNA相对应的表达含量。采用MTT法分析高迁移率组蛋白B1基因沉默后对结直肠癌Lovo细胞的生长的影响;流式细胞术分析高迁移率组蛋白B1基因沉默后对结直肠癌Lovo细胞周期及增殖的影响;Transwell小室侵袭实验分析高迁移率组蛋白B1基因沉默后对结直肠癌Lovo细胞体外侵袭的影响;细胞划痕实验分析高迁移率组蛋白B1基因沉默后对结直肠癌Lovo细胞体外迁移的影响以及裸鼠成瘤实验分析高迁移率组蛋白B1基因沉默后对结直肠癌Lovo细胞裸鼠体内生长的影响。结果结直肠癌体外细胞株Lovo可成功被慢病毒介导的小分子RNA所转染。HMGB1 m RNA在HMGB1-si RNA转染组的Lovo细胞中的相对表达水平为0.24±0.04,明显低于HMGB1 m RNA在阴性对照组中的0.82±0.13和HMGB1m RNA在空白对照组中的0.93±0.15(P<0.05)。同理,HMGB1蛋白在HMGB1-si RNA转染组Lovo细胞中的相对表达水平为0.21±0.03,同样明显低于HMGB1蛋白在阴性对照组中的1.15±0.18和HMGB1蛋白在空白对照组中的1.21±0.20(P<0.05)。在体外细胞生长方面,MTT法显示HMGB1-si RNA转染组Lovo细胞的生长速度与阴性对照组及空白对照组相比较,均有所降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在细胞增殖指数PI方面,流式细胞术显示HMGB1-si RNA转染组Lovo细胞的38.27±1.32,与阴性对照组的54.66±1.74和空白对照组57.43±1.29相比明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在穿膜细胞数方面,Transwell小室侵袭实验显示HMGB1-si RNA转染组为(14.0±3.5)个/高倍视野,与阴性对照组的[(51.0±6.7)个/高倍视野]和空白对照组的[(68.0±5.3)个/高倍视野,P<0.05]相比明显降低,差异具有统计学意义。细胞划痕实验显示,lovo细胞经过划痕后培养48 h时,HMGB1-si RNA转染组Lovo细胞中的迁移距离为(83.61±23.21)μm,明显低于阴性对照组的[(202.86±46.46)μm]和空白对照组[(214.58±57.38)μm,P<0.05]。最后的裸鼠成瘤实验中我们发现当实验21天后,处死小鼠完整获取移植瘤,移植瘤最终体积(521±34)mm3,明显小于阴性对照组[(763±46)mm3]和空白对照组[(802±51)mm3,P<0.05]。结论结直肠癌体外细胞Lovo中高迁移率组蛋白B1基因表达可有效被慢病毒介导的RNA干扰技术所沉默,当高迁移率组蛋白基因表达受到小分子干扰RNA干扰表达沉默后,可有效减缓结直肠癌细胞的生长速度,延长其增殖周期,抑制其体外生长,明显降低lovo细胞在体外的侵袭及迁移的能力,与此同时我们发现在裸鼠体内移植瘤体积下降,说明其可有效抑制裸鼠移植瘤的生长增殖。