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随着我国经济的快速发展和人口老龄化及人们生活方式的改变,心、脑血管疾病的发生率日益增高。脑卒中为常见的脑血管疾病,具有发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高、并发症多等特点,给患者家庭及社会带来沉重的负担。流行病学调查研究表明,缺血性脑卒中占卒中发病率75%以上,且存在性别差异,即绝经后女性患病率远远高于绝经前女性及同年龄段男性。因此,寻找有效的脑缺血保护措施具有重要的理论与实践意义。已有的研究表明,远隔肢体缺血后处理(Remote limb ischemia postconditioning,RLIP)作为非侵入的治疗,可以减轻血脑屏障的损伤,减轻炎症的作用,同时具有费用小、创伤小、临床可实施性强等特点,但其机制需进一步研究。SDF-1/CXCR4在中枢神经系统中有重要作用,研究证明SDF-1/CXCR4在中风后缺血区上调,但SDF-1/CXCR4是否在肢体缺血后处理中起调节作用我们尚不清楚。本研究采用手术绝经大鼠全脑缺血模型,探讨RLIP是否通过SDF-1/CXCR4对脑缺血起保护作用及其可能的分子机制。方法:SDF级三月龄雌性SD大鼠,行双侧卵巢切除术,建立手术绝经模型;一周后,建立四动脉结扎全脑缺血(Global Cerebral Ischemia,GCI)模型。实验动物随机分为假手术组(Sham),缺血再灌注组(Ischemia reperfusion,IR),远隔肢体缺血后处理组(Remote limb ischemic postconditioning,RLIP),SDF-1特异拮抗剂组(RLIP+AMD3100,AMD3100)。免疫荧光双染色和western blot技术检测大鼠海马CA1区SDF-1与星形胶质细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP),CXCR4、小胶质细胞标志蛋白Iba1的蛋白表达,并检测磷酸化ERK1/2、P38的表达水平。用ELISA技术检测血清和海马区CA1区SDF-1的含量。结果:1.SDF-1与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光双染色结果显示GFAP与SDF-1的结果趋势一样。与sham组相比,IR组GFAP和SDF-1的荧光强度显著增强(P<0.01);与IR组相比,RLIP组GFAP和SDF-1的荧光强度降低(P<0.01);与RLIP组相比,AMD3100组GFAP和SDF-1的荧光强度降低(P<0.01)。2.SDF-1的western blot结果和GFAP western blot结果显示GFAP与SDF-1的结果趋势一样。与sham组相比,IR组的SDF-1和GFAP的灰度值显著增强(P<0.01);与IR组相比,RLIP组GFAP和SDF-1的灰度值降低(P<0.01);与RLIP组相比,AMD3100组GFAP和SDF-1的灰度值降低(P<0.01)。3.SDF-1海马区ELISA结果,与sham组相比,IR组的SDF-1含量显著增加(P<0.01),与IR组相比,RLIP组SDF-1含量下降(P<0.01),与RLIP组相比,AMD3100组降低(P<0.01);SDF-1血清ELISA结果,与sham组相比,IR组的SDF-1含量下降(P<0.01),与IR组相比,RLIP组SDF-1含量升高(P<0.01),与RLIP组相比,AMD3100组显著降低(P<0.01)。4.CXCR4与小胶质细胞标志物(Iba1)免疫荧光双染色结果显示:CXCR4与Iba1共定位,且表达趋势相同,与sham组相比,IR组Iba1和CXCR4的荧光强度显著增强(P<0.01);与IR组相比,RLIP组Iba1和CXCR4的荧光强度降低(P<0.01);与RLIP组相比,AMD3100组Iba1和CXCR4的荧光强度显著降低(P<0.01)。5.CXCR4和Iba1的western blot结果显示:与sham组相比,IR组的CXCR4和Iba1的灰度值显著增强(P<0.01);与IR组相比,RLIP组CXCR4和Iba1的灰度值降低(P<0.01);与RLIP组相比,AMD3100组CXCR4和Iba1的灰度值显著降低(P<0.01)。6.p-ERK1/2和p-p38免疫荧光双染色结果显示:与sham组相比,IR组p-ERK1/2的荧光强度显著降低(P<0.01),与IR组相比,RLIP组p-ERK1/2的荧光强度增强(P<0.01),与RLIP组相比,AMD3100组p-ERK1/2的荧光强度显著降低(P<0.01)。p-p38的荧光结果为:与sham组相比,IR组p-p38的荧光强度显著增强(P<0.01),与IR组相比,RLIP组p-p38的荧光强度降低(P<0.01),与RLIP组相比,AMD3100组p-p38的荧光强度无统计学意义(P>0.05)。7.p-ERK1/2和ERK1/2,p-p38的western blot结果显示。与sham组比较,IR组p-ERK1/2表达降低(P<0.01),与IR组相比,RLIP组表达增高(P<0.01),与RLIP组相比,AMD3100组p-ERK1/2的含量降低(P<0.05)。ERK1/2各组之间的western blot结果显示,ERK1/2的含量没有统计学意义;与sham组比较,IR组p-p38表达升高(P<0.01),与IR组相比,RLIP组p-p38表达降低,(P<0.01),与RLIP组相比,AMD3100组p-p38的含量无统计学意义(P>0.05)。结论:1.RLIP可能通过抑制IR后海马CA1区SDF-1/CXCR4轴降低神经炎症损伤,对切除卵巢雌性大鼠发挥神经保护作用。2.ERK1/2通路的激活和P38信号的抑制可能是RLIP调控SDF-1/CXCR4轴降低缺血后炎症损伤的分子机制。