目的：糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病危害较大的微血管并发症，也是致死、致残的主要原因之一。据报道，在欧美国家，终末期肾病(end-stage renaldisease,ESRD)约有1/3为糖尿病所致，且75％为2型糖尿病。该病预后差，死亡率高，严重威胁人类的健康。目前国内外对本病尚无理想的治疗方法和药物。 DN典型的病理改变为。肾脏肥大、基底膜增厚、肾小球细胞外基质成分积聚等，其发病机制主要与高血糖、肾脏血流动力学异常、家族遗传性等有关。近年来随着分子生物学技术的进步，多项研究发现有多种细胞因子参与了DN发病进程。在这些细胞因子中，以转化生长因子(TGF-β)为核心因子，其作用涉及到肾小球血流动力学改变、细胞外基质代谢、细胞增殖和细胞肥大等诸多方面。Smad蛋白是目前所知TGF-β受体的胞内激酶底物，介导了TGF-D的胞内信号转导。这二者在DN发生、发展过程中都起着重要的作用。 石家庄市中医院肾内科专家经过多年临床探索，总结出的治疗DN的有效验方保元Ⅱ号(黄芪、当归、冬虫夏草、生地、山药、山萸肉等)，采用益气扶正，活血通络的方法治疗本病，取得了较好的疗效。因此本实验采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型，观察保元Ⅱ号对血糖、肾功能、血脂、肾脏形态及相关细胞因子TGF-β1和Smad表达的影响，探讨本方的作用机理，为临床治疗DN提供科学的实验依据。 方法：选用清洁级雄性健康SD大鼠50只，随机抽10只为正常对照组(normal group，N)，其余40只按65mg·kg-1腹腔注射链尿佐菌素(STZ)，48h后尾尖取血，测定血糖，取尿测尿糖。血糖≥16.7mmol·L-1，尿蛋白阳性视为成膜。将30只成模大鼠随机分为：糖尿病肾病模型组(DN-modolgroup，DN)、中药保元II号治疗组(BaoyuanⅡcapsule group，DN-Z)、苯那普利治疗组(Benazepril group，DN-B)，n=10。各组均不给予任何降糖西药。本实验共8周。于第8周用代谢笼收集24小时尿液，检测24小时尿蛋白(urinary protein，Upro)定量和尿β2微球蛋白(urinary β2-MG)。最后一次给药后，禁食8小时，股动脉取血，分离血清，检测空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)，尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)，血肌酐(serum creatinine，Scr)，血浆白蛋白(albumin，ALB)、血总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)。无菌操作取肾脏，去掉包膜，取小块的肾组织固定，甲醛固定用于观察肾脏病理改变；液氮固定检测TGF-β和Smad蛋白的表达。血、尿生化指标均用全自动生化分析仪测定。RT-PCR方法检测TGF-β1和Smad2、Smad3、和Smad7的表达。 结果: 1保元Ⅱ号对血、尿生化指标的影响 1.1保元Ⅱ号对FBG的影响DN组FBG(26.54±3.67)明显高于N(6.1±0.81)组，有显著性差异(p＜0.01)。经用药干预后，治疗组与DN组相比无显著性差异(p＞0.05)。DN-B组(26.31±3.16)与DN-Z组(25.87±3.42)相比无显著性差异(p＞0.05)。 1.2保元II号对DN大鼠24小时Upro的影响DN组(2.51±0.62)明显高于N组(1.03±0.21)，有显著性差异(p＜0.01)。经用药干预，DN-B(1.34±0.31)组和DN-Z组(1.35±0.29)均低于DN组，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组与DN-B组比较无显著性差异(p＞0.05)。 1.3保元II号对DN大鼠血脂TC、TG、HDL和LDL的影响。 DN组TC(1.66±0.15)高于N组(1.19±0.14)，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组(1.64±0.16)、DN-B组(1.64±0.17)同DN组相比无显著性差异(p＞0.05)，DN-Z组和DN-B组相比无显著性差异(p＞0.05)DN组TG(0.63±0.13)高于N组(0.51±0.09)，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组(0.57±0.11)与DN组相比明显下降(p＜0.01)，有显著差异。DN-B组(0.61±0.12)同DN组相比无显著性差异(p＞0.05)；DN-Z组明显低于DN-B组，有显著性差异(p＜0.01)。 DN组HDL(0.54±0.16)低于N组(0.61±0.07)，有显著性差异(p＜0.01)。DN.Z组(0.59±0.13)与DN组相比明显上升(p＜0.01)，有显著差异。DN-B组(0.55±0.12)同DN组相比无显著性差异(p＞0.05)；DN-Z组明显高于DN-B组，有显著性差异(p＜0.01)。 DN组LDL(1.05±0.16)高于N组(0.86±0.08)，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组(0.97±0.15)与DN组相比明显下降(p＜0.01)，有显著差异。DN-B组(1.04±0.18)同DN组相比无显著性差异(p＞0.05)；DN-Z组明显低于DN-B组，有显著性差异(p＜0.01)。 1.4保元Ⅱ号对DN大鼠BUN和Scr的影响与N组(5.14±0.58)相比，DN组BUN(25.13±2.02)明显升高，有显著性差异(p＜0.01)。治疗组与DN组相比明显下降，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组(15.17±3.22)和DN-B组(15.13±2.42)之间无明显差异(p＞0.05)。 DN组Scr(187.78±24.55)与N组(71.24±13.06)相比明显升高，有显著性差异(p＜0.01)。各治疗组与DN组相比明显下降，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组(93.83±8.24)和DN-B组(94.47±14.80)之间无明显统计学差异(p＞0.05)。 1.5保元Ⅱ号对DN大鼠尿β2-MG的影响。 DN组尿β2-MG(0.540±0.033)明显高于N组(0.078±0.006)，有显著性差异(p＜0.01)。治疗组与DN组相比下降，有统计学差异(p＜0.01)。DN-Z组(0.362±0.029)和DN-B组(0.372±0.019)相比无统计学意义(p＞0.05)。 1.6保元Ⅱ号对DN大鼠血浆蛋白ALB的影响DN组(22.50±3.04)明显低于N组(33.45±4.55)，有显著性差异(p＜0.01)。DN-Z组(27.96±2.64)明显高于DN组，有显著性差异(p＜0.01)。DN-B组(23.01±2.95)与DN组比较无统计学意义(p＞0.05)。 2.保元Ⅱ号对DN大鼠肾脏病理变化的影响与正常组比较，药物治疗组与模型组皆出现肾小球体积明显增大，肾小球系膜区扩张，细胞外基质成分增多，阳性物质沉积增多。尤其模型组，多数大鼠出现弥漫性系膜增生。DN-B组、DN-Z组皆能在一定程度上改善系膜增生以及动脉病变的程度。 3.保元II号对DN大鼠TGF-β1和Smad2、Smad3、Smad7mRNA表达的影响与模型组相比较，DN-Z组和DN-B组肾脏中TGF-β1表达均有下降，Smad2和Smad3表达也有下调，DN-Z组和DN-B组Smad7表达较DN组有上升。 结论: 1.保元II号能够减少尿蛋白的丢失，提高血浆蛋白含量，降低尿β2微球蛋白，降低尿素氮、血肌酐，降低甘油三酯、低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白。 2.保元II号能够下调TGF-β1的mRNA表达，从而减少肾组织系膜内基膜样物质沉积，延缓肾小球基底膜增厚，减轻或延缓DN进展。其机制可能与调节Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达有关。