前言 1，2，4—三氯苯(1，2，4—TCB)在自然环境和工业生产中广泛存在，它在自然环境中长期存留和富集会产生一系列环境问题。美国国家环保局(EPA)已将其列入环境污染物清单。 国内外许多学者对1，2，4—TCB的毒性已经作了大量研究，随着活性氧自由基与疾病研究的进展，揭示出自由基与多种毒物损伤存在着密切关系。自由基在体内产生，可发生脂质过氧化，破坏细胞膜的生物功能，造成机体损伤。本研究通过测定急性不同剂量染毒对小鼠全血、心、脑、肝脏和肾脏的氧化损伤，并观察亚急性不同剂量染毒引起的各脏器病理改变，为制订我国1，2，4—TCB的卫生标准提供参考。 材料与方法 1．实验动物分组及染毒 1．1 实验用小鼠40只，雌雄各半，体重25±3克，随机分成4组，每组10只，1个对照组，3个实验组，染毒方式为皮下注射，对照组注射生理盐水，实验组给药剂量分别为1382.2mg／kg、2764.4mg／kg和4146.6mg／kg，染毒一次，24小时后，乙醚麻醉，摘眼球取血，断髓处死小鼠后解剖取出心、脑、肝脏和肾脏，生理盐水冲洗、滤纸滤干后冰冻保存。 1．2 实验用小鼠16只，随机分成4组，每组4只，1个对照组，3个实验组，给实验组皮下注射1，2，4—TCB，剂量分别为1382.2mg／kg、2764.4mg／kg和4146.6mg／kg，对照组注射生理盐水，染毒4次，间隔4天，第4次染毒后24小时断髓处死动物，解剖取肝脏和肾脏皮质，制成光镜和电镜病理切片。 2．观察指标与检测方法 2．l 各组织测定前准确称重并制作组织匀浆，血清和组织中LPO的测定用硫代巴比妥酸门BA）法，全血和组织中超氧化物歧化酶uOD）活力的测定用亚硝酸盐（Nitrite－hi）法、谷脱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活力的测定用二硫双硝基苯甲酸（DTNB）法、总流基门一SH）和非蛋白流基（NP－SH）含量的测定用洲一man＼法。血红蛋白含量的测定用氰化高铁血红蛋白法，组织蛋白的测定用双缩豚法。 2．2 光镜：常规的10％福尔马林固定、石蜡包埋0E染色；电镜：2．5％戊二醛初固定＊％的饿酸后固定，双重染色。用光镜和透射电镜观察组织和细胞内部结构的变化，比较实验组和对照组的组织病理变化。 实验结果 1．血液和组织中LPO、SOD、GSH－Px、T—SH、NP－SH的测定 小鼠皮下注射入2，4—TCB 24小时后，脑低、中、高三个剂量组和肝脏中、高剂量组的LPO含量显著高于对照组。同时，脑低。中、高三个剂量组的SOD活力、NP－SH含量以及低剂量组T－SH和m－SH含量、高剂量组“H－Px活力与对照组相比均有显著性差异；肝脏中、高剂量组NP－SH含量和GSH－Px活力与对照组相比明显降低，而高剂量组SOD活力与对照组相比却显著增高；肾脏低、中、高三个剂量组的GSH－Px活力以及低剂量组的NP－SH含量与对照组相比明显降低。全血低、中、高三个剂量组的GSH－Px活力与对照组相比显著降低，但中剂量组的T－SH ·2·和m－SH含量却显著升高。表明 1，2，4—TCB进人体内后血液和组织中脂质过氧化作用增强，相应地引起血液和组织中抗氧化酶类的变化。 2．组织病理形态学观察 问）光镜结果 肝脏：对照组肝细胞胞浆均匀，无空泡，偶见轻度水样变；低剂量组肝细胞轻度水样变，汇管区有淋巴细胞、白细胞浸润和血管扩张充血；中剂量组肝细胞水样变，有点状坏死、再生及间质炎细胞浸润、肝窦及小血管扩张充血；高剂量组肝细胞水样变性明显，肝窦及小血管扩张充血，可见点、灶状及桥接坏死，肝细胞再生及汇管区炎细胞浸润。 肾脏：对照组肾小球、小管结构正常，小管上次轻度水样变；低剂量组小管上皮轻度水样变，肾间质血管充血；中剂量组小管上皮细胞水样变性，小球毛细血管丛及间质血管充血；高剂量组小管上皮中度水样变性，小球毛细血管丛、间质血管扩张充血，肾小管管腔内有蛋白渗出，间质炎细胞浸润。 光镜下实验组与对照组比较损伤程度有明显差异，并随1，2，4—TCB浓度增高损伤程度加重，但无性别差异。 p）电镜结果 肝脏：对照组胞浆可见丰富的线粒体、内质网，未见异常改变。损伤组：线粒体肿胀，畸变短进而消失，内质网扩张，呈空泡状。核膜、细胞膜弯曲、变形，核染色质分布不均，向核膜聚集，基质疏松水肿。 肾脏：对照组胞浆可见丰富的线粒体、内质网，未见异常改变。损伤组：胞浆内线粒体肿胀，崎突起进而消失，内质网广泛解体、离得，有处呈空泡化，核膜弯曲变形，基质疏松水肿。 ·3· 讨 论 脂质过氧化物中毒性最大的是丙二醛（MDA厂它的含量增多提示机体内的膜质和蛋白质等生物大分子结构遭到活性氧自由基的损伤。国内的流行病学调查结果表明：车间内接触1，2，4—TCB的工人大部分出现神经衰弱症状，表现为失眠、头晕、记忆力减退。本实验结果显示，小鼠染毒 1，2，4／CB 24?