【摘 要】
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羧甲基化是开发利用壳聚糖对其进行化学修饰的方法之一,其产物羧甲基壳聚糖无毒,水溶性优,应用前景广阔。羧甲基壳聚糖的合成,一般采用氯乙酸法。本实验室首次发现,羧甲基壳
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羧甲基化是开发利用壳聚糖对其进行化学修饰的方法之一,其产物羧甲基壳聚糖无毒,水溶性优,应用前景广阔。羧甲基壳聚糖的合成,一般采用氯乙酸法。本实验室首次发现,羧甲基壳聚糖中存在一种小分子特殊杂质——二甘醇酸(DGA),具有一定的细胞毒性,对羧甲基壳聚糖的临床应用造成干扰。本文以羧甲基壳聚糖中特殊杂质——DGA为研究对象,根据其理化性质建立了相应的高效液相检测方法,探讨了杂质DGA的生成原因,并以产物羧甲基度和杂质DGA生成量两项为综合指标,优化了羧甲基壳聚糖的工艺合成路线。本文建立的二甘醇酸检测色谱条件为：色谱柱：Atlantis C-18(5μm, 150mm×4.6mm.ID)柱；流动相：甲醇/10mmol·L-1磷酸二氢钾(pH 2.50)=3/97(v/v)；流速：0.6 mL·min-1;柱温：30℃；检测波长：λ=204 nm；杂质样品提取液：甲醇/水(8/2)。羧甲基壳聚糖的最终优化合成路线为：反应温度50℃,反应时间3h,壳聚糖与NaOH质量比1：4,NaOH与氯乙酸质量比1：1；羧甲基壳聚糖的合成提纯步骤同步优化。本文首次发现了羧甲基壳聚糖合成中特殊杂质DGA,建立了相应的专属的HPLC检测方法,优化了羧甲基壳聚糖的合成工艺,为羧甲基壳聚糖的质量控制提供了新的指标与方法学依据,从而为羧甲基壳聚糖的进一步生产应用奠定了良好的基础。
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