近几年来,人们对包涵体的生物学功能及其潜在的应用价值有了全新的认识。对于具有细胞毒性的蛋白或者结构不稳定的短肽,利用其包涵体形式的重组表达显示出独特的天然优势,然而,目前诱导重组蛋白包涵体形成的方法比较单一,主要是利用易于形成包涵体的融合标签介导目的蛋白包涵体的形成。本论文构建了一系列融合蛋白的胞内以及分泌表达载体。硫氧还蛋白TrxA作为常用的增强目的蛋白可溶性表达的融合标签,与基因pEGF、Metch或Andropin融合、高效诱导表达后,融合蛋白以可溶性的形式在大肠杆菌细胞内积累明显;然而将信号肽OmpA或DsbC连接于融合蛋白的N末端时,诱导表达可导致大量的包涵体形成,且较低的诱导温度有利于包涵体的积累。这一结果表明,信号肽可在一定程度上诱导重组蛋白形成包涵体。这一新发现为基于包涵体形式的重组蛋白表达提供了新途径。抗菌肽因其独特的杀菌机制显示出潜在的应用前景,探索抗菌肽高效、简便的重组表达方法具有重要的理论与实践意义。本论文利用信号肽可诱导重组蛋白包涵体形成这一新发现,在大肠杆菌中成功实现了基于包涵体形式的抗菌肽高效重组表达,与其相对应的胞内可溶性表达相比,包涵体形式的抗菌肽表达量提高了约50%。包涵体的蛋白纯度较高,在本研究分离的包涵体中,重组蛋白的含量超过70%;本论文还建立了包涵体的分离、溶解以及相应的TEV蛋白酶切割重组蛋白释放抗菌肽的技术体系;活性检测结果表明,本研究表达的重组抗菌肽表现出良好的抗菌活性。与目前已报道的抗菌肽表达纯化方法相比,本论文建立的技术体系,其表达量高,纯化方法更简便、高效,以期为大规模工业化生产抗菌肽提供新思路、新方法,进而推动抗菌肽药物的研发与实际应用。