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茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,是一种具有重要生物学功能的天然抗氧化剂,能够清除自由基,抗突变,抗癌变。在抗肿瘤、防治心血管疾病、降血压与血糖、抑菌抗病毒、抗龋牙护齿、防紫外线照射等方面有重要的应用价值。茶多酚的主要成分是儿茶素类化合物,包括表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)>表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素(EC)。儿茶素单体基本结构均为2-连(或邻)苯酚基苯并吡喃衍生物。茶多酚类物质脂溶性差,极大影响了其生理生化功能,限制了茶多酚的开发利用。国内有研究人员利用化学法对茶多酚进行改性,增强其脂溶性。化学法存在制备成本高、反应条件剧烈、产物易变性等缺点。我们利用固定化脂肪酶对儿茶素单体EGCG进行分子修饰,改善其脂溶性,取得了比较好的结果。EGCG分子量大,含有酚羟基,化学性质稳定。脂肪酶作为催化剂难于催化EGCG与普通中长链脂肪酸生成EGCG酯。我们筛选出以乙酸乙烯酯、月桂酸乙烯酯等作为酰基供体与EGCG进行酯化反应,取得了良好的效果。多种脂肪酶包括NOVO435, RMIM, TLIM, LA201056,实验室自制固定化脂肪酶都能够对其进行催化合成,其中实验室自制固定化脂肪酶的催化效果最好。反应在极性较强的有机溶剂中,包括丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃中取得较好效果。加酶量为EGCG质量的1-2倍,EGCG与乙酸乙烯酯的底物摩尔比为1：5以上,选择丙酮作为反应介质时,EGCG能够在24h内几乎完全转化。EGCG含有多个酚羟基,脂肪酶催化的选择性不强,酰基供体与多个酚羟基反应,生成结构相近,性质相似的EGCG乙酸酯混合物。建立了以线性梯度洗脱为主要方式的HPLC分析检测方法.HPLC条件：色谱柱,KromasilC18(4.6mm i.d,250mm,5μm)；流速：1ml/min;温度：室温条件下；检测波长：280nm紫外检测。流动相A为甲醇,流动相B为超纯水。梯度程序确定为25%A(10min)→进样(30min)→60%A(10min)→25%A。主要产物得到较好的分离度,一次分析能在60分钟内完成。利用LC-MS和中红外光谱对EGCG和乙酸乙烯酯反应产物做出定性,利用核磁共振仪对产物1H-NMR进行鉴定。LC-MS结果显示EGCG的酚羟基被CH3CO—基团单取代、二取代、三取代为乙酸酯,中红外光谱检测和1H-NMR谱也表明CH3C0—与EGCG形成酯键。