肝水解肽注射液（Heparolysate Injection）及注射用肝水解肽（Heparolysate forInjection）能促进蛋白质合成，减少蛋白质分解。促进正常肝细胞的增殖和再生，对四氯化碳诱导的肝细胞损伤有较好的保护作用，降低谷丙转氨酶，促进病变组织恢复，主要用于慢性肝炎、肝硬化等疾病的辅助治疗。本课题在肝水解肽注射液原有质量标准的基础上，对肝水解肽注射液质量标准提高进行探索性研究，同时根据药典标准和标准提高后的检验结果，对其中一厂家的工艺进行优化，目的是增加肝水解肽注射液的安全性和有效性。采用高效液相色谱法对注射液中多肽的特征图谱进行确定；采用凝胶色谱法对注射液中多肽的具体分子量分布进行确定；采用紫外-可见分光光度法对注射液亚硫酸氢钠的含量进行检测，并确定限度；采用阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法对注射液中游离氨基酸、水解AA进行检测，并确定水解AA减去游离AA的限度；采用MTT、CCK-8方法对注射液中多肽的活性进行检测；采用药典中规定的生物安全性试验方法对注射液的安全性进行检测。综合注射液的药典标准和标准提高后的检测结果，在厂家工艺基础上，以多肽得率和多肽活性为评价指标，对提取工艺进行了优化。单因素试验考察了酶解前的煮沸时间、酶解时间、温度、pH以及胰酶浓度对多肽得率的影响。在单因素试验的基础上，采用正交实验优选了多肽的酶解工艺条件，确定最佳提取工艺为：酶解前煮沸15min、水解时间3h、水解温度45℃、水解pH8.5、胰酶浓度6.0g/kg。药理学试验表明按照工艺优化提取的注射液不仅多肽含量高而且多肽活性有明显提高，结合本课题中研究的标准，在肝水解肽注射液的安全性和疗效性两个方面有明显提高，达到了本次课题的目的和要求。