生姜内生细菌分离鉴定及促生效果研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:naruto_Dragonballlll
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本文旨在从生姜中分离内生细菌,探明其生物多样性,进而筛选高效植物促生细菌,为开发内植物生细菌资源提供基础。以采自贵州贵阳、重庆、四川雅安、眉山等地的生姜为材料,采用常规方法分离生姜内生细菌,应用BOX-PCR和16S rDNA PCR-RFLP,16S rDNA序列分析技术研究生姜内生细菌的遗传多样性和系统发育地位,进而筛选具有生防和促生功能的生姜内生细菌,探明其产IAA、溶磷和产载体能力,并通过玉米盆栽试验验证菌株的促生效果。获得了以下结果:1.从采自贵州贵阳、重庆、四川雅安、四川眉山等地的生姜中共分离到57株内生细菌,BOX-PCR和16S rDNA PCR-RFLP研究了生姜内生细菌的遗传多样性,进而选取34株代表菌测定了16S rRNA基因全序列,结果表明,生姜内生细菌具有丰富的遗传多样性,分属于α变形菌纲(a-Proteobacteria)、β变形菌纲(β-Proteobacteria)、γ变性菌纲(y-Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)的苍白杆菌属(Ochrobactrum)、不动杆菌属(Acinetobacter)、窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)、肠杆菌属Enterobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、土壤杆菌属(Agrobacterium)以及Tetrathiobacter等9个属。2.测定了34株代表菌株的生防功能,结果表明,有11株内生菌拮抗番茄早疫病(Alternaria solani),14株内生菌对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)有拮抗作用,11株内生菌对黄瓜炭疽病菌((Colletotrichum turcium)有拮抗作用;其中7株菌同时能拮抗3种病原菌。34株细菌的促生试验表明,有16株具有产IAA的能力,包括苍白杆菌属(Ochrobactrum)、土壤农杆菌属(Agrobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)、沙雷氏菌属(Serratia)以及芽孢杆菌属(Bacillus)的菌株,IAA产量介于1.02-45.35μg/mL之间;18株菌具有产铁载体的能力,其产铁载体活性单位为9.47-70.66%之间;16株菌具有溶解无机磷的能力,包括苍白杆菌属(Ochrobactrum)、假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)以及芽孢杆菌属(Bacillus)的菌株,在添加5g/LCa-P、2g/LAl-P和1g/LFe-P的发酵液中,有效磷含量分别介于9.32-233.05μg/mL、1.14-9、和2.98-55.42 μg/mL之间。3.盆栽试验验证菌株QW11 (Pseudomonas sp.、QW40 (Ochrobactrum sp.)、QW45 (Serratia sp.、QW48 (Ochrobactrum sp.)、QW52 (Bacillus sp.)和QW57 (Pseudomonassp.)其对玉米的促生效果,结果表明,单接种促生菌,玉米株高、叶面积、地上部分和地下部分干重分别比对照增加17.57-37.61%、20.52-48.54%、25.62-49.64%和6.16-62.72%;植株氮、磷以及钾含量分别增加26.76-79.18%、26.32-85.53%和8.40-26.59%。接种促生细菌结合施肥,玉米株高、叶面积、地上部分干重和地下部分干重分别比对照增加了11.26-27.85%、4.96-30.34%、9.79-34.04%和16.95-48.91%;植株全氮、全磷和全钾含量分别比对照增加]1.05-85.01%,5.63-30.28%和2.64-20.30%。同时,接种促生细菌可增加根际细菌数量,提高土壤微生物量碳、氮及磷。
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