临床上,许多患者会同时服用多种药物,因此临床医师必须谨慎用药,以避免发生药物-药物相互作用(Drug-Drug interaction,DDI)。药物-药物相互作用主要与细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)的抑制或诱导有关系[1]。细胞色素P450酶的抑制可能会导致作为受害者的药物的代谢受阻,降低其体内清除率,从而使该药物的体内暴露量增加,引起毒性反应。相反,细胞色素P450酶的诱导可能会使受害者药物的代谢加快,使其在体内的清除加快,体内暴露量降低,从而无法达到药效,使得药物失去其基本作用。介于药物-药物相互作用对药物在体内代谢及处置过程产生的重要影响,在FDA和CFDA颁布的临床前研究指导中已经明确要求在新药临床研究申请(IND)时递交的研究资料要包含DDI研究[2][3]。药物代谢酶种类繁多,其中细胞色素P450酶家族是最重要的代谢酶家族之一,其参与了市场上大约75%的药物的代谢。因此由细胞色素P450酶介导的DDI是重点考察对象。常用的细胞色素P450酶相关的模型有细胞色素P450重组酶、肝微粒体、S9、肝细胞等。由于筛选阶段化合物的溶解性问题,在体外应用细胞色素P450酶进行抑制研究时,或多或少会引入一些有机溶剂。然而,由于有机溶剂会使酶蛋白变性,影响酶活,因此有机溶剂的量必须控制在一定范围内[4]。本论文应用肝微粒体研究细胞色素P450酶的抑制实验、考察有机溶剂对五种重要的细胞色素P450酶的标准底物的代谢活性的影响,同时对CYP3A4的激活实验方法进行研究,其内容主要包括:1)对以肝微粒体为材料,采用混合底物法研究细胞色素P450酶的抑制实验中有机溶剂甲醇、乙腈、DMSO对五种重要细胞色素P450酶(CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4)活性的影响进行考察,以优化实验条件。2)利用人肝微粒体为材料,对已知的CYP3A4激活剂依法韦仑进行研究,考察依法韦伦对CYP3A4对其标准底物咪达唑仑代谢活性的影响,建立本实验室评价CYP3A4激活的实验方法。同时应用该方法,对新药研发中发现的新化合物实体对CYP3A4的激活作用进行研究。