兔脂肪干细胞与PLA-PEG共聚物生物相容性研究

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuanxuaner8
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:建立兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells,rADSCs)的分离培养方法,探讨rADSCs的生物学特性,及其体外复合聚乳酸-聚乙二醇共聚物(polylactide-polyethylene glycol copolymers,PLA-PEG)的生物相容性,为进一步构建脂肪干细胞组织工程化角膜组织提供实验基础。  方法:(1)采用胶原酶消化法及贴壁筛选法分离纯化rADSCs,采用体外诱导成骨、成脂实验对rADSCs的多向分化潜能进行验证。(2)采用不同复感染指数(Multiplicities of infection,MOI)值的慢病毒载体转染rADSCs,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光(green fluorescence protein,GFP)表达的情况并统计其相应的转染效率,MTT法检测负载GFP的慢病毒转染对细胞生长状态的影响情况,进一步评价GFP负载慢病毒对细胞的毒性情况。(3)将转染的rADSCs接种于PLA-PEG支架上,通过Hoechst DNA定量法观察第1天至第8天材料上细胞的增殖情况;LDH细胞毒性检测评估PLA-PEG材料对rADSCs的细胞毒性;激光共聚焦显微镜、扫描电子显微镜观察接种后1,3,5和7天细胞在支架上的生长、粘附等情况。  结果:(1)原代rADSCs多呈短棒状、聚集生长倾向。传代后细胞均匀、呈成纤维细胞样生长。体外成脂分化诱导2周,油红O染色胞质可见红色脂滴;成骨分化诱导2周茜素红染色可见矿化结节。(2)当复感染指数MOI为50、100、500时慢病毒介导GFP均可成功转染rADSCs,MOI为100时,细胞转染效率可达50%以上且对细胞的正常生长没有显著影响。(3)MTT法显示细胞接种于PLA-PEG材料后随时间延长细胞数量增加,第7天细胞生长达到高峰。激光共聚焦显微镜显示,细胞在PLA-PEG材料上生长良好且随培养时间延长细胞数量增加。扫描电子显微镜显示,细胞在材料表面紧密贴附并分泌细胞外基质使细胞紧密生长。  结论:(1)采用胶原酶消化及细胞贴壁筛选可以获得了形态较为均一的rADSCs,并体外证实了其具有成骨、成脂等多向分化能力。(2)慢病毒介导GFP基因可以成功导入rADSCs且稳定表达,可作为rADSCs组织工程的细胞示踪标记,对细胞的分布及转归进行示踪。(3)rADSCs可以在PLA-PEG材料上紧密粘附并且分泌细胞外基质,细胞与材料具有较好的生物相容性,有望应用于组织工程化角膜组织的进一步研究。
其他文献
末端病(Enthesiopathy)是由于末端区长期承担过度负荷,肌腱、韧带、关节囊纤维层等组织与骨的附着部分发生慢性劳损性变性而引起的疾患。末端病发生时不仅有组织损伤,同时也伴
竹盐是纯天然微量元素的宝库,含有大量丰富的矿物质和微量元素钠、钙、硅、钾、镁、铜、铁、锌、硒等.竹盐依等级分为一烤、三烤、九烤,以九烤的为质量最佳,而九烤竹盐中最顶
期刊
Yoon and Yoo recently proposed a robust authenticated encryption scheme and claimed their scheme has the properties of forward secrecy and confidentiality. The
期刊
疫情对经济停摆的影响深远,不仅使得发展速度减缓,而且将带来产业结构的重组.在新的产业链尚没有明朗之际,理应更多地发挥创客的作用;遗憾的是,舆论对“双创”的关注沉寂了不
期刊
目的:研究他汀类药物对核因子κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在自发性高血压大鼠(SHR)大血管中表达的影响,探讨其预防高血压所伴发的动脉粥样硬化的可能机制。
目的:探讨γ射线、BCNU以及联合作用诱导大鼠胶质瘤C6细胞凋亡的过程中,C-junN-末端激酶(JNK)信号转导通路的作用。 方法:1.流式细胞仪检测γ射线、BCNU作用后不同时间点C6细
中医药是我国劳动人民智慧的结晶,是中华文化的瑰宝,也是我们劳动人民几千年来同疾病作斗争的产物,无论过去、现在和将来必将发挥着不可替代的作用.然而,有一段时间人们对中
期刊
自古至今疗伤治病,主要有两大医疗体系,中医和西医.rn中医是我国劳动人民智慧的结晶,是几千年来同疾病作斗争的产物,无论过去、现在和将来必将发挥着不可替代的作用.中医中药
期刊
每个年轻人都有自己的特质和潜能,也都有发展自我创造精彩人生的理想与愿望。徐颖超,亲身经历坎坷与成功后,作为国赛金牌选手的她,成功升入苏州大学就读本科专业,缔造了技能兼得学
In this article, we have reviewed available evidence for diagnosis, treatment, and follow-up in female breast cancer(BC). Into daily clinical practice some cont