用于子孢子检测的单克隆抗体的制备及相关研究

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本研究旨在制备针对疟原虫环子孢子蛋白(CSP)保守Ⅱ~+区及糖酵解途径中的醛缩酶(ALD)的单克隆抗体,探索其用于子孢子检测的可行性。 采用恶性疟原虫CSP保守Ⅱ~+区多肽免疫BALB/c小鼠,获得3株分泌针对保守Ⅱ~+区的杂交瘤细胞株。ELISA检测显示获得的单克隆抗体能与重组表达的恶性疟原虫CSP片段特异性反应,与蚊虫组织无反应。间接免疫荧光试验(IFA)显示,单克隆抗体不仅能识别恶性疟原虫子孢子,也能识别约氏疟原虫子孢子,但与约氏疟原虫子孢子反应的荧光强度明显弱于与恶性疟原虫子孢子的反应。 克隆恶性疟原虫海南株ALD编码区基因,在大肠杆菌表达获得可溶性蛋白。纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,获得7株分泌针对ALD的杂交瘤细胞株。IFA显示有4株能识别培养的恶性疟原虫,与恶性疟原虫有反应的4株中有2株能识别约氏疟原虫。 该项研究的资料可为研究媒介体内原虫监测以及有性期原虫的糖代谢过程提供基础资料。
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