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目的:检测结肠癌患者肿瘤组织中Th17细胞和Treg细胞及其外周血中相关细胞因子,分析Th17/Treg在结肠癌患者的变化情况及其与临床病理组织分型之间的关系,探讨与肿瘤发生和发展的关系及可能的机制。方法:根据结肠癌Dukes分期将28例结肠癌患者分为两组:早期结肠癌组(n=8)和进展期结肠癌组(n=20),所有入选病例均未接受过放化疗或其他干预性治疗。分离20例结肠癌患者及20例健康志愿者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclearcell,PBMC),并于术中切取的结肠癌患者(n=28)大体标本中取材肿瘤组织及癌旁正常组织,分别作为实验组及对照组。1.运用流式细胞术(Fluorescence-activated cellsorting,FACS)分析结肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织中Th17细胞及Treg细胞/CD4+T细胞的比例。2.采用免疫组织化学技术(Immunohistochemistry,IHC)检测肿瘤组织及癌旁组织中Thl7细胞及Treg细胞的分布。3.采用逆转录聚合酶链反应技术(ReverseTranscription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)检测结肠癌患者外周血中Th17/Treg细胞相关细胞因子IL-23和IL-10。结果:1.早期结肠癌肿瘤组织中Th17细胞/CD4+T细胞和Treg细胞/CD4+T细胞的比例明显高于癌旁正常组织(8.38±2.86%VS3.56±1.26%和7.13±1.65%VS2.74±1.09%,P<0.05);进展期结肠癌肿瘤组织中Th17细胞/CD4+T细胞和Treg细胞/CD4~+T细胞的比例明显高于进展期癌旁正常组织(9.23±1.37%VS4.82±1.56%和16.57±3.78%VS3.45±1.67%,P<0.05);且进展期结肠癌肿瘤组织中Treg细胞/CD4+T细胞的比例高于早期(16.57±3.78%VS7.13±1.65%,P<0.05);但进展期结肠癌肿瘤组织中Th17细胞/CD4+T细胞的比例较早期无明显差异(9.23±1.37%VS8.38±2.86%,P>0.05);而进展期结肠癌肿瘤组织中Th17/Treg细胞的比例比早期偏低(P<0.05)。2.免疫组织化学技术检测结肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中Thl7细胞及Treg细胞结果表明,早期结肠癌肿瘤组织内Th17阳性细胞数和Treg阳性细胞数明显高于早期癌旁正常组织(17.2±1.3VS2.6±3.6和16.5±2.4VS3.8±2.5,P<0.01);进展期结肠癌肿瘤组织内Th17阳性细胞数和Treg阳性细胞数明显高于进展期癌旁正常组织(19.3±2.8VS2.8±2.1和30.3±3.2VS4.1±1.2,P<0.01);早期结肠癌肿瘤组织内Th17阳性细胞数较进展期无明显差异(17.2±1.3VS19.3±2.8,P>0.05);而早期结肠癌肿瘤组织内Treg阳性细胞数明显低于进展期(16.5±2.4VS30.3±3.2,P<0.05)。3.RT-PCR检测结果显示,结肠癌患者外周血中IL-23、IL-10mRNA转录水平升高,与健康对照组差异明显(P<0.05),且IL-10mRNA表达水平结肠癌进展期与早期之间差异显著(0.98±0.07%VS0.62±0.05%,P<0.05),而IL-23在两组间无明显差异(0.72±0.02%VS0.68±0.03%,P>0.05)。结论:随着疾病的进展,肿瘤组织内的Th17细胞及Treg细胞/CD4~+T细胞比例及阳性细胞数逐渐升高,且Treg细胞比Th17细胞升高更加明显。细胞因子在Th17细胞及Treg细胞的分化发育过程中发挥重要作用,相关细胞因子IL-23和IL-10在结肠癌外周血中的变化趋势和Th17细胞及Treg细胞在肿瘤组织中的变化趋势相一致,提示Th17细胞及Treg细胞在结肠癌的表达可能与肿瘤免疫环境相关的细胞因子调节有关,为进一步揭示Thl7/Treg平衡调节机制和结肠癌的免疫治疗提供一种理论和实验依据。