【摘 要】
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HLH蛋白主要包括一类广泛的转录因子,HLH蛋白之间的相互作用在细胞增殖、组织特异性分化方面发挥着重要的作用.Id蛋白是HLH蛋白中的一类,为dnHLH蛋白,通过与bHLH形成没能功能
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HLH蛋白主要包括一类广泛的转录因子,HLH蛋白之间的相互作用在细胞增殖、组织特异性分化方面发挥着重要的作用.Id蛋白是HLH蛋白中的一类,为dnHLH蛋白,通过与bHLH形成没能功能的异二聚体来阻碍bHLH和DNA的结合.为了探讨人Id基因在细胞增殖、分化及调亡中的作用,研究人员利用RT-PCR技术从人肺癌细胞PG中获得占全长76﹪的正义Id1和反义Id1、反义Id2基因,构建到真核表达载体pXJ41-neo上,获得正反义真核表达重组质粒,分别命名为pXJ41-SID1、pXD41-AId1、pXJ41-AId2.用Superfect法转染PG细胞,经G418筛选,通过一系列的克隆的亚克隆获得稳定表达正反义的Id1、反义Id2的细胞株中PS1、PA1、PA2.发现PA1、PA2细胞生长受到明显抑制,倍增时间延长;而PS1细胞与对照细胞相比,生长情况没太大变化.PS1、PA1、PA2细胞生长的血清依赖性明显增加.Westernblot结果表明在这些过程中,有p27、pRb、p53等蛋白的参与.这些结果和Id基因的异常表达,导致PG细胞的中心体复制及分离的异常,形成异倍体细胞,造成其细胞周期调控脆弱有关.
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