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目的:胆道闭锁(biliary atresia,BA)是婴儿肝内、外胆管的一种进展性、阻塞性和炎症性疾病。Kasai手术是胆道闭锁的主要治疗方式,然而术后患儿肝脏仍然进行性纤维化直至肝硬化,因此有必要探究影响肝脏纤维化的因素。肝祖细胞(hepatic progenitor cells,HPCs)具有双向分化的潜能,既能分化成肝细胞又能分化成胆管上皮细胞。肝祖细胞在急性严重肝损伤和慢性肝损伤中增殖扩增,并参与肝脏的重构、炎症和纤维化。因此本研究提出假设:肝祖细胞在胆道闭锁中是否激活增殖,并与肝脏纤维化是否相关。材料与方法:收集上海交通大学附属儿童医院9例胆道闭锁患儿肝脏作为实验组(BA),并收集4例肝母细胞瘤周围正常肝组织作为对照组(CON)。通过实时荧光定量聚合酶链锁反应(RT-PCR)、免疫荧光和蛋白印迹分析(western blot)等方法检测肝组织中Fn14的表达情况,并同时检测肝祖细胞标记物CD133和肝纤维化指标α-SMA的表达。再由两位经验丰富的病理科医生依据Ishake分级系统分别对实验组和对照组肝组织进行纤维化分级,把胆道闭锁组肝组织分为轻微纤维化组(BA1,I-IV级)和严重肝纤维化组(BA2,V-VI级),同时分析两组肝纤维化中Fn14的表达水平。利用SPSS16.0软件对数据进行分析,Graphpad prim 5软件绘画柱状图和Adobe Illustrator CS6软件对照片进行处理。结果:(1)在胆道闭锁组Fn14蛋白(2.10±0.53 vs 0.97±0.20,p=0.001),CD133蛋白(2.23±0.57 vs 1.00±0.03,p=0.000)和α-SMA蛋白(4.96±2.40 vs 1.00±0.22,p=0.001)的表达水平明显高于对照组,并且差异有统计学意义。(2)Fn14细胞和CD133细胞表达在肝脏的纤维化区域,同时Fn14细胞也共同表达CD133,表明Fn14阳性的细胞是祖细胞。CON组几乎没有发现Fn14和CD133的表达。(3)Fn14细胞和α-SMA细胞表达在肝脏的纤维化区域,并且Fn14细胞散在分布于α-SMA细胞中,两者相互毗邻。在CON组α-SMA没有表达。(4)在严重肝纤维化组(BA2)中Fn14的表达明显高于轻微肝纤维化组(BA1)(2.60±0.35 vs 1.86±0.42,p=0.012),并且轻微肝纤维化组中的Fn14的表达也高于对照组(1.86±0.42 vs 0.97±0.20,p=0.001)。结论:在胆道闭锁中Fn14肝祖细胞激活扩增,并且可以激活肝星形细胞参与肝脏的纤维化进程。