目的：通过髓核抽吸术，建立兔椎间盘退行性变模型，观察骨髓间充质干细胞移植后椎间盘在影像学、组织学、细胞外基质蛋白表达的变化，评价利用骨髓间充质干细胞移植治疗椎间盘退行性疾病的效果。方法：（1）兔椎间盘退行性变模型建立取6月龄健康新西兰大白兔18只，雌雄不限，体重2.5kg左右，随机分为髓核抽吸组和对照组，每组9只。经腹膜正中切口入路暴露L3-4、L4-5、L5-6椎间盘，髓核抽吸组利用21G针头刺入所暴露椎间盘抽吸髓核5mg，对照组仅分离暴露椎间盘，不做任何处理。术后4、8、12周每组随机选取3只行MRI影像学检查，测量椎间盘高度和T2加权像信号强度变化；大体标本观察椎间盘组织形态。（2）兔骨髓间充质干细胞的体外分离培养在无菌条件下取出健康1月龄新西兰兔股骨、胫骨内骨髓混合液5ml，采用全骨髓培养法加贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞，并观察其细胞形态、贴壁率及细胞生长动力曲线，对细胞体外生物学行为进行研究。（3）骨髓间充质干细胞移植治疗兔椎间盘退行性变取6月龄健康新西兰大白兔36只，雌雄不限，体重2.5kg左右，随机分为正常对照组、细胞移植组和椎间盘退变组，每组12只，经腹膜正中切口入路暴露L3-4、L4-5、L5-6椎间盘。正常对照组不做任何处理，椎间盘退变组仅抽吸髓核，细胞移植组在抽吸髓核后向损伤的椎间隙各注入2.0105个/ml的骨髓间充质细胞50μl。三组动物分别于术后4、8、12周行MRI影像学检查，测量椎间盘高度和T2加权像信号强度；HE染色与番红固绿染色观察椎间盘组织结构形态；CollagenⅡ免疫组化染色与Aggrecan免疫荧光染色观察髓核细胞外基质蛋白的表达；RT-PCR检测椎间盘髓核组织中细胞外基质Aggrecan、CollagenⅡ两种基因mRNA的表达水平。结果：（1）动物模型观察：兔腰椎MRI检查显示，对照组椎间盘高度稳定，T2加权像始终呈高强度信号。髓核抽吸组的椎间盘T2信号强度在术后表现为进行性降低，术后4周椎间盘亮度变暗，椎间盘高度也逐步下降，到术后8周时椎间盘高度几乎完全丢失。各观察时间点，两组椎间盘高度和T2信号强度比较差异均有统计学意义（P<0.05）。离体标本解剖形态显示对照组纤维环与髓核边界清晰，髓核呈透明胶冻样充满整个椎间盘空隙。髓核抽吸组在术后4周，纤维环形态基本完整，髓核体积缩小，椎间盘高度变低。而8、12周后髓核组织变性干缩，纤维环结构紊乱，甚至发生破裂。（2）兔骨髓间充质干细胞的体外分离培养：体外培养24h后开始贴壁，5d后细胞基本贴壁完全，15d左右细胞融合率达90％以上；细胞增殖迅速，短时间内可以获得足够的种子细胞数量；12代内细胞未发生变性、分化。（3）骨髓间充质干细胞移植治疗兔椎间盘退行性变：MRI影像学检查发现，与正常对照组相比，椎间盘退变组在4、8、12周椎间盘高度、T2加权像信号强度表现出不同程度降低(p<0.05)，并呈随时间下降的趋势。而细胞移植组与椎间盘退变组相比，4周后上述指标均有上升（P<0.05），第8周和第12周时，细胞移植组与正常对照组相比椎间盘高度和T2加权像信号强度无明显差异(p>0.05)；HE染色与番红固绿染色结果显示椎间盘退变组随时间进展，椎间盘结构发生紊乱，髓核组织和外周纤维环分界不清。细胞移植组4、8、12周组织结构分界清晰，细胞核及细胞浆染色明显；CollagenⅡ免疫组织化学染色提示椎间盘退变组染色细胞的数量及胞外基质分泌水平逐渐下降。细胞移植组与正常对照组椎间盘相比，退变程度相对较轻，在4、8、12周两组间比较没有明显差异(p>0.05)；Aggrecan免疫荧光染色显示正常对照组椎间盘髓核组织呈红色阳性反应，整个椎间盘结构清晰。细胞移植组中央髓核组织在各时间点呈阳性反应，细胞间质中可见明显红色荧光，大体结构仍保持完整。椎间盘退变组在4周时髓核荧光强度开始变浅，8、12周后荧光强度明显降低，甚至失染，髓核形态模糊；RT-PCR检测椎间盘退变组Aggrecan、CollagenⅡ两种基因mRNA的表达水平在4、8、12周呈明显下降趋势，与正常对照组相比有差异(p<0.05)；细胞移植组的上述指标在第4周经过短暂下降，12周后即发现与正常对照组两基因mRNA表达水平接近，两组对比无明显差异(p>0.05)。结论:1.髓核抽吸法可以诱导兔椎间盘退行性变，退变早期的影像学与组织形态改变符合Thompson分级III级，模型制作简单，重复性好。2．采用全骨髓培养法加贴壁法分离骨髓间充质干细胞，方法简便，体外培养细胞增殖能力强且连续传代表型稳定，是种子细胞的良好来源。3．移植的骨髓间充质干细胞能够在髓核内存活，并且有增殖能力，可以延缓椎间盘的退变及促进退行性变椎间盘的修复。