孕激素在淋球菌引起的中性粒细胞症反应中的调节作用

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目的:研究孕激素在淋球菌引起的中性粒细胞炎症反应中的调节作用,探讨其在女性无症状感染中作用的可能机制。   方法:①收集无症状女性淋病患者宫颈分泌物,对淋球菌菌株进行分离,培养,鉴定,制备成OD600=0.15(约108/ml)的淋球菌细菌悬液,保存备用。②提取正常人外周血中性粒细胞,将其随机分为孕激素组(A组),淋球菌组(B组),干预组(C组),对照组(D组)共4组。A组:每孔加入10ng/mL 孕激素1mL;B组:加入与孕激素等量的PBS 液30min 后,加入淋球菌悬液进行刺激,使MOI=10;C组:加入孕激素孵育30min,再添加淋球菌悬液;D组:仅加入等量的PBS 液进行对照。③在0,3,8,12,24小时荧光定量RT-PCR分别测定各组中性粒细胞中iNOS,TNF-α,IL-1βmRNA含量。④Western Blot 测定B,C 两组iNOS蛋白水平。   结果:①荧光定量RT-PCR显示,B组和C组中iNOS,TNF-α,IL-1βmRNA表达水平均升高;B组在8小时达到高峰,以后逐渐下降;C组中三者水平明显低于B组(P<0.05)。而A,D组各因子含量无明显变化。②Western Blot 结果显示,淋球菌组和孕激素干预组iNOS蛋白水平升高,淋球菌组明显高于干预组(P<0.05)。   结论:孕激素能够下调iNOS及炎症介质TNF-α、IL-1β的表达,从而抑制淋球菌引起的中性粒细胞炎症反应,可能在女性无症状感染中起重要作用。
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