黄瓜枯萎病是一种真菌土传病害,由尖孢镰孢菌黄瓜专化型引起,具有毁灭性,在全世界范围内发生,且在我国各地区都存在。黄瓜的产量会因为枯萎病而降低10%~30%,糟糕时甚至可达80%~90%,黄瓜生产中,最严重的就是枯萎病,能造成极大的经济损失。黄瓜种植区域连年增长,因此黄瓜枯萎病也越来越严重。所以,对黄瓜枯萎病的防治方法研究已成为生产中的重要问题。目前,药物控制是一个重要的方法防治枯萎病,然而因为缺少效率高、毒性小、没污染的杀菌剂,农药残留会威胁人类的身体健康。因为枯萎病是土传病害,土壤药剂处理面积过大,很难进行,耗资很高。现代社会不断发展,人们越来越重视非污染的绿色食品,并且越来越重视环境保护,生物防治已引起人们的关注。集价格低廉、抑制植物病虫害发生效果显著、同时增加作物产量、提高品质等多种积极作用于一身的蚯蚓粪进入了人们的视野。本研究从蚯蚓粪中筛选对黄瓜枯萎病菌具有拮抗作用的微生物,以期为今后生防菌在黄瓜枯萎病的防治奠定基础。采用稀释平板法,从新鲜蚯蚓粪中分离到374株细菌。筛选出对黄瓜枯萎病菌有拮抗活性的菌株28株,其中以D2的抑菌效果最好,抑菌直径达28.28 mm,且抑菌效果稳定。D2单菌落形态为圆形或近圆形,扁平状,中等大小,表面光滑,不透明。革兰氏染色为阴性。菌体杆状,不产生芽孢,(0.5~1.0)um×(1.5~4.0)um。在4℃不生长,41℃可以生长。在Na Cl浓度小于5%时可生长,大于7%时不生长。不产生荧光,可使明胶液化,可分解淀粉。D2的分子生物学鉴定中,得到目的片段大小为1462 bp,将得到的PCR产物测序结果和Genbank里的序列进行同源性比较,显示该菌株为洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cenocepacia)。对D2的发酵培养基成分和培养条件进行了优化,筛选出最佳实验室发酵配方:酵母膏1%,蔗糖0.5%,Na Cl 0.3%,NH4NO3 0.3%;最佳培养条件:发酵温度30℃,培养基p H 6.0,接种量2.0%,装液量为100 m L的三角瓶中装液40 m L。D2发酵液优化条件下的对黄瓜治疗试验,D2稀释50倍时防效达70.48%,稀释100倍时防效达69.89%,稀释150倍时防效达69.58%,多菌灵防效达78.09%,D2稀释50倍防效仅次于多菌灵的防效。D2发酵液对黄瓜枯萎病预防试验,D2发酵液稀释50倍时,防治效果达到77.82%,稀释100倍时,防治效果为77.56%,稀释150倍时,防治效果为76.52%,多菌灵防效达70.59%,D2发酵液稀释50倍时防效比多菌灵的防效多7.23个百分点。