蚕虫草的人工培育研究及有效成份分析

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蚕虫草是一种由蛹虫草菌寄生于家蚕幼虫身上并产生子实体的一种虫菌复合物。家蚕因其最容易饲养、培育规模最大、且形态与冬虫夏草虫体最为接近而被选作寄主。家蚕幼虫体和蛹虫草菌都具有很高的药用价值,其培育出来的蚕虫草是野生冬虫夏草最佳的替代品。本文以家蚕幼虫作为寄主,筛选感染死体蚕和活体蚕的最佳菌种,在优化死体蚕处理方法及死体蚕虫体生长条件的同时,重点考察了活体蚕虫草培育工艺路线,成功培育出了感染率高的蚕虫草,并对培育成功的蚕虫草中的主要有效成分进行了分析检测。1、通过对死体蚕虫草和活体蚕虫草感染菌种的筛选研究,确定了死体蚕虫草最佳的感染菌种为C23蛹虫草菌株和活体蚕虫草最佳的感染菌种为C22蛹虫草菌株。同时,筛选出了最佳的接种方法为注射液体菌种法。2、通过对死体蚕的处理方式及死体蚕虫草生长条件的优化研究,建立了死体蚕虫草的培育路线。研究表明,最佳的死蚕处理方法为将家蚕于100℃烘干30min,然后121℃高压灭菌;死体蚕虫草菌丝阶段的最佳生长条件为温度23℃、湿度70%;子实体阶段的最佳生长条件为温度23℃、湿度90%、光强150lx。3、通过对活体蚕虫草人工培育的方法优化研究,建立了活体蚕虫草的培育路线。筛选出了蚕体的最佳体表消毒方法为紫外照射30min,前期培养温度为7℃,低温培养时间为8d,注射量为0.3mL,培养土为粘土,培养土的含水量为15%。两次重复试验得出此培育路线的平均感染率高达89%。4、对蚕虫草各个部位(子实体、虫体、整体)的主要有效成分虫草多糖、虫草素和虫草酸进行了分析,并与野生冬虫夏草、蛹虫草子实体的主要有效成分含量进行了对比分析。结果表明蚕虫草中主要有效成分大部分集中在子实体中,子实体中虫草素的含量约为蚕体的2.45倍,多糖含量约为蚕体的2.98倍,虫草酸含量约为蚕体的5.45倍。蚕虫草的主要有效成分与野生冬虫夏草、蛹虫草进行对比,蚕虫草子实体中虫草素和多糖含量最高,其中蚕虫草中虫草素约为野生冬虫夏草子实体的2.98倍,为蛹虫草子实体的1.73倍;而多糖含量约为冬虫夏草子实体的6.61倍,蛹虫草子实体的1.52倍;但蚕虫草中的虫草酸含量较低,其含量约为冬虫夏草的0.42倍,蛹虫草子实体的0.5倍。而虫体中虫草素的含量也高于野生冬虫夏草的虫体,约为野生冬虫夏草虫体的2.66倍,但其虫草多糖和虫草酸的含量低于野生冬虫夏草的虫体,分别约为野生冬虫夏草虫体的0.38、0.05倍。与野生冬虫夏草整体的有效成分比较研究发现,蚕虫草的虫草素含量高于野生冬虫夏草,约为冬虫夏草的2.6倍,多糖的含量与野生冬虫夏草大致相当,其含量约为冬虫夏草的0.91倍,虫草酸的含量则低一些,约为冬虫夏草的0.24倍。蚕虫草中氨基酸的含量远高于蛹虫草子实体,其整体氨基酸含量约为蛹虫草子实体的2.57倍,其中必需氨基酸的含量约为蛹虫草子实体的1.66倍,半必需氨基酸约为蛹虫草子实体的1.6倍。
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