含重楼提取物及透明质酸的复合剂对痤疮疗效的实验及临床研究

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目的:探索含重楼提取物及透明质酸的复合剂对痤疮炎症性皮损的改善作用。方法:1.建立痤疮动物模型:取3只ICR小鼠,分别在左耳注入20u1无菌PBS,右耳注入20ulP.acnes菌液(1×107CFU/20ul),24h后处死小鼠取耳朵组织。通过以下指标检测建模是否成功:耳朵肿胀度测量,HE染色,CDllb免疫组化染色,透射电镜观察炎症细胞浸润,耳朵匀浆后厌氧培养72h计数菌落数。2.对比观察抑菌效果:分别在48只ICR小鼠每只耳朵皮内注入20ulP.acnes菌液(1×107CFU/20ul),构建小鼠痤疮动物模型。将小鼠均分为A、B、C、D四组,A、B、C组的小鼠每只耳朵分别外用对应编号为A、B、C的复合剂(A.基质+透明质酸B.基质+透明质酸+1%克林霉素C.基质+透明质酸+0.25%重楼提取物),一天两次,每次20u1,D组不作治疗。于治疗第24h、7d、14d、21d,测量小鼠耳朵肿胀度,并每组处死三只小鼠。取右耳组织匀浆稀释后,做细菌培养,计数细菌菌落数。左耳10%中性甲醛固定,做HE染色,凋亡(TUNEL, TdT-mediated dUTP nick end labeling)染色。3.临床观察:对比含重楼、马齿苋提取物、透明质酸钠的清痘修复精华液与含木瓜蛋白酶活性胶囊、维他命B3、马齿苋提取液、水杨酸衍生物的清痘修复精华液对痤疮皮损改善的临床观察。结果:1.建立痤疮动物模型:右耳(注入P.acnes菌液)耳朵厚度较左耳(注入PBS)厚,HE染色左耳无明显炎症细胞浸润,右耳大量炎症细胞浸润。CDllb染色,左耳阴性,右耳可见阳性染色细胞。电镜下观察,左耳无巨噬细胞、炎症细胞浸润,右耳可见炎症细胞浸润。2.抑菌效果动物实验:外用含重楼提取物及透明质酸的复合剂与外用1%克林霉素的小鼠耳朵肿胀度相当(P≥0.05),细菌培养菌落计数于第7d,14d,21d与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),但两组间对比差异无统计学意义(P≥0.05)。相同时间点,每组间HE染色无明显差异。第21d,每组TUNEL染色均为阴性。3.临床观察:含重楼、马齿苋提取物、透明质酸钠的清痘修复精华液与含木瓜蛋白酶活性胶囊、维他命B3、马齿苋提取液、水杨酸衍生物的清痘修复精华液对比,对痤疮皮损改善作用差异无统计学意义(P≥0.05),均对痤疮皮损有改善。结论:1.ICR小鼠耳朵皮下注入1×107CFU/20ul能成功构建小鼠痤疮动物模型;2.外用含重楼提取物及透明质酸的复合剂对痤疮小鼠模型有抑菌效果,作用与外用1%克林霉素相当;3.含重楼、马齿苋提取物、透明质酸钠的清痘修复精华液对痤疮皮损有改善作用。
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