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大菱鲆(Scophthalmus maximus)于1992年由黄海水产研究所首先引入国内,在苗种驯化、亲鱼培育、人工育苗、工厂化养殖以及人工配合饲料等方面取得重大技术突破后,迅速在我国形成工厂化大规模养殖。随着养殖规模的扩大,对苗种的需求也日益增大。在育苗过程中,由于苗期培育密度大、鱼苗对疾病的抵抗力弱、防病措施不完善等原因,疾病的发生率、传染率、死亡率都极高,各种疾病的发生给鱼苗造成了严重危害。由于大菱鲆是一个新引进的品种,目前国内在疾病学研究方面基本是一片空白。 通过2002~2003年的流行病学调查发现了两种主要的细菌性疾病,依照外观症状,将它们称之为白鳍症和黑瘦症。这两种疾病发生率高,造成鱼苗急性死亡。白鳍症的主要症状是鱼背、腹鳍浊白,严重的个体伴有鳍部溃烂,但不呈现出血现象;患病鱼不吃食,上浮于水面,游泳无力,濒死个体体色变暗。25~40天的仔稚鱼容易感染此病,在发病鱼池中,被感染的鱼在5~6天内死亡率常达90%以上。黑瘦症病鱼体色变黑,身体消瘦,头大,身体小,呈畸形;病鱼不摄食,营养不足,与同期正常鱼苗相比个体较小,活力差,发育迟缓,变态率低,一般孵化后7~18天的鱼苗易被感染。这两种疾病在国内外均没有相关报道。 本文对白鳍症、黑瘦症的病原学进行了较系统的研究。对患有白鳍症鱼苗进行细菌分离得到优势菌株Y13,经创伤及菌浴感染实验证明它是白鳍症的病原菌。组织病理分析表明病原菌导致的感染是全身性的,病鱼的鳍、肝、脾、肾、脑以及鳃等部位都有不同程度的病变。病原菌Y13的主要特征是:革兰氏染色阴性,弯杆状,大小(1.7~2.1)×(0.3~0.5)μm,极生单鞭毛,氧化酶和过氧化酶反应阳性,无泳动现象,不产生色素,发酵葡萄糖产酸不产气,不产生H2S,最适生长盐度为3%,最适生长温度为20~30℃,pH生长范围为5.0~9.0。用API 20E结合其它方法进行生理生化特性测定及初步鉴定,发现病原菌与Vibrio anguillarum特性最为相近。克隆了菌株Y13近全长的16S rRNA基因序列,在构建的系统发育树中病原菌与Vibrio anguillarum亲缘关系最近。综合生理生化特征及16S rRNA基因序列分析,将病原菌Y13鉴定为鳗弧菌(Vibrio anguillarum)。养叭人菱鲜苗期主要细菌性疾病的研究 从患黑瘦症的病鱼中分离出两种优势菌Bl、BZ,它们为革兰氏阴性菌,杆状,氧化酶、过氧化酶反应阳性,对0/129敏感,发酵葡萄糖产酸不产气。人工感染实验证明它们对鱼苗均具有致病性。’常规方法结合165 rRNA基因序列分析,将Bl鉴定为灿烂弧菌(巧brio .Plen‘h〔lu,),BZ鉴定为弧菌属细菌(巧brio sP.)。 研究结果表明弧菌是大菱虾育苗期间的主要致病病原,本论文是国内鳗弧菌和灿烂弧菌引起大菱虾苗疾病的首次报道。对上述主要致病细菌进行了20余种常见药物的抗生素敏感实验。在此基础上研制的药物己进行了中试临床试验,证明对鱼苗发生的黑瘦症和白鳍症有良好的防治效果。