产酸细菌和嗜热、嗜碱丝状真菌的筛选与鉴定

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微生物是一类重要的生物资源,是现代工业生物技术发展的生物学基础。为此,本文通过对产酸细菌、嗜热丝状真菌和嗜碱丝状真菌的筛选、鉴定和分类,可有助于进一步开发利用这些微生物资源。本研究通过对中国高校工业微生物资源与信息中心3465株细菌的筛选,最后从中筛选出490株具有产酸能力的细菌。根据产酸菌株的黄色圈直径和菌落直径的比值,选取了 90株比值较大(比值大于或等于3.0)的细菌,利用16S rDNA序列同源性比对法进行分类鉴定,结果表明,90株产酸细菌分属于17个属,其中芽孢杆菌属中Ba cilluslicheniformis B0415 的产酸能力最强,选取B.licheniformis B0415 为研究对象,对其进行摇瓶发酵,运用HPLC检测发酵液中的有机酸,发现其产生的混合酸为柠檬酸、丙酮酸、苹果酸、乳酸和乙酸,其中苹果酸的比例较高,为下一步利用其进行发酵产苹果酸的研究奠定了基础。本研究还从南非采集了 76个土样,经样品的预处理、富集培养和稀释涂布,从中分离出50株嗜热的丝状真菌和110株嗜碱的丝状真菌。并进一步通过对不同来源土样中微生物数量的研究,发现嗜热的丝状真菌主要是从温度较高的堆肥中分离获得的;嗜碱的丝状真菌主要是从pH偏碱性的海边土壤中分离而来。运用ITS序列同源性比对法对其中的80株丝状真菌进行鉴定,30株嗜热的丝状真菌分布于10个属,15个种;50株嗜碱的丝状真菌分布于12个属,25个种。在ITS鉴定结果的基础上,分别从Thermomyces(嗜热真菌属)、Aspergillus(曲霉属)、Talaromyces(蓝状菌属)、Fusarium(镰孢属)、Mucor(毛霉属)、Penicillium(青霉属)和Rhizomucor(根毛霉属)七个属中各选取一株真菌对其群体形态特征与个体形态特征进行了分析。同时,对ITS鉴定结果进一步分析和构建系统发育树,发现Thermomyces dupontii、Talaromyces cylindrospora、Thermomucor indicae-seudaticae、Fusarium keratoplasticum、Fennellomyceslinderi和Nectria haematococca六个种在国内没有任何单位有其保藏物。同时,由于Fusarium keratoplasticum的耐碱能力最强,且发现该菌具有产脂肪酶的能力,所以以该菌株作为后续脂肪酶的研究对象。
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