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食品是人类赖以生存和发展的最基本的物质条件，食品安全直接关系到人类的健康。随着全球经济一体化和食品贸易的国际化，食品安全已经成为一个重要的公共卫生问题。动物源性食品中的兽药残留也与人类的健康息息相关。近年来，沙丁胺醇等β2-受体激动剂的非法使用对人体健康造成很大的威胁。由于动物源性食品中兽药残留品种多、化学结构和性质各异、浓度低、样品基质复杂、干扰物质多，其分离纯化已成为兽药残留分析技术中的重点和技术瓶颈。因此，研究和开发新的样品分离、纯化和检测技术成为兽药残留分析领域中的关键技术。本文采用生物化学手段，制备沙丁胺醇多克隆抗体，结合高效液相色谱(HPIC)、液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)等现代仪器分析手段，研究并建立了动物源性食品中痕量兽药残留的分离、纯化和检测技术，所建立的方法对于控制动物养殖中沙丁胺醇的非法使用和保障食品安全都具有重要的意义。
本研究采用对氨基苯甲酸方法(ABA法)和N，N-羰基二咪唑法(CDI法)合成沙丁胺醇半抗原，再与阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)进行偶联，分别制得免疫原SAL-ABA-cBSA和SAL-CDI-cBSA，用鸡卵清蛋白(OVA)分别制备包被抗原SAL-ABA-OVA和SAL-CDI-OVA，并用两种免疫原对动物进行免疫以获得沙丁胺醇抗体，采用辛酸硫酸铵法纯化沙丁胺醇多克隆抗体，用抗体包被固相载体，建立了沙丁胺醇的间接竞争酶联免疫测定方法(IC-ELISA)。并将纯化的抗体与溴化氰活化的4％琼脂糖凝胶(Sepharose-4B)偶联，制备沙丁胺醇免疫亲和柱(IAC)，作为样品的净化和分离手段，与HPLC、HPLC-MS/MS、气相色谱-质谱法(GC-MS)和气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)结合，用于动物源性食品中沙丁胺醇的残留检测，考察了HPLC-MS/MS和GC-MS法测定沙丁胺醇的基质效应，取得了如下研究结果：
①制备了特异性的多克隆抗体。采用ABA和CDI两种方法成功合成了沙丁胺醇的人工抗原SAL-ABA-cBSA和SAL-CDI-cBSA，包被原SAL-ABA-OVA和SAL-CDI-OVA，经过与兔子免疫，获得两种方法的多克隆抗体，其抗体的效价分别为1:20000和1:15000。ABA法合成的免疫原能够用于ELISA试剂盒和免疫亲和柱的制备；应用SAL-ABA-cBSA免疫制备的多克隆抗体与沙丁胺醇、特布他林和克伦特罗均有较好的交叉反应，交叉反应率分别为100％、100％和205％，对沙丁胺醇和特布他林的IC50均为2.05 ng/mL，对克伦特罗为1.0 ng/mL；应用SAL-CDI-cBSA免疫制备的多克隆抗体与沙丁胺醇、特布他林和克伦特罗的交叉反应分别为100％、72％和15％，对三种兽药的IC50分别为18.5 ng/mL、25.6 ng/mL和120ng/mL；
②建立了高灵敏度的沙丁胺醇酶联免疫测定方法。根据不同稀释倍数的多抗血清吸光度值，取OD值1.0左右，包被抗原的最适稀释比为1:4000，浓度为0.4μg/mL；羊抗兔酶标二抗的稀释比为1:7500，通过间接ELISA法测得血清的最适稀释比为1:250。IC-ELISA检测沙丁胺醇的IC50为1.1 ng/mL，最低检出限为0.1ng/mL，沙丁胺醇加标浓度为0～8.1 ng/mL时，回收率为70±10％，适用于猪尿中沙丁胺醇的快速筛测，其灵敏度比目前商品化试剂盒提高了3～5倍；
③制备了高性能的沙丁胺醇免疫亲和柱：柱容量为400 ng/g基质，偶联率为98.6％，具有良好的特异性，能够重复使用6次以上；
④采用免疫亲和柱净化/液相色谱法，建立了动物源性食品中沙丁胺醇的简便、快速和灵敏测定方法。该法的检出限为0.25 ng/g，最低定量限为0.5 ng/g，灵敏度比现有方法提高2倍以上。平均回收率为87.4～94.6％，相对标准偏差小于10％；
⑤采用免疫亲和柱净化/液相色谱-串联质谱法，建立了动物源性食品中沙丁胺醇的简便、快速和灵敏的测定方法。该法测得猪肝中沙丁胺醇的CCα和CCβ分别为0.018 ng/g和0.050 ng/g；
⑥比较了免疫亲和柱与常规SPE柱净化/液相色谱串联质谱测定动物源性食品中沙丁胺醇的基质效应，免疫亲和柱能够很好地消除样品的基质效应；
⑦以免疫亲和柱净化，建立了动物源性食品中沙丁胺醇残留检测的气相色谱-质谱和气相色谱-串联质谱法。其定量限(LOQ)分别为0.5 ng/g和0.1 ng/g。其中，气相色谱-串联质谱法的灵敏度比现有文献报道提高了5倍。