目的：建立稳定的糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）模型，研究比较1型和2型两种糖尿病肾病发病机制的异同点，探讨Toll样受体4（TLR4）在两种DN模型中的作用。　　通过研究红活麻总香豆素(Total coumarins)对高糖诱导下大鼠肾脏系膜细胞HBZY-1的保护作用，以及对STZ诱导的大鼠糖尿病肾病模型的作用，探讨红活麻总香豆素治疗DN的效果以及其可能分子机制。　　方法：（1）大鼠尾静脉注射大剂量链脲佐菌素（STZ,60mg/kg）建立1型糖尿病模型。高糖高脂饲料联合小剂量(30mg/kg)尾静脉注射STZ2型糖尿病模型。每周测定大鼠体重、血糖、尿蛋白等糖尿病肾病相关指标。第18周取大鼠血清测定肌酐（Scr）、尿素氮（BUN），甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）。取肾脏切片做HE和Masson染色，检测大鼠肾脏结构及纤维化程度。Western blot检测大鼠肾脏转化生长因子（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、TLR4蛋白表达的变化。　　（2）体外培养HBZY-1细胞，无血清培养基(DMEM;NG,5.5mmol/L)饥饿培养24h后，更换高糖培养基（25mmol/L），同时用不同浓度红活麻总香豆素干预，设高剂量（T1、100μg/ml）、中剂量（T2、50μg/ml）、低剂量（T3、10μg/ml）三个浓度梯度，分别培养24h、48h和96h；低糖培养基中加19.5mmol/l甘露醇设为正常对照组。显微镜下观察细胞生长状况、体积大小；噻唑蓝（MTT）法测定24h、48h和96h时各组细胞增殖情况。收集48h时细胞蛋白，Western blot测定TGF-β1、CTGF、TLR4蛋白表达水平。　　（3）取60只雄性Wistar大鼠，10只空白对照，另外50只尾静脉注射STZ60mg/kg建立大鼠糖尿病模型，注射当天记为第0天。大鼠糖尿病造模成功后（空腹血糖平均值>16.65mmol/L），将50只模型大鼠分组：模型对照组12只，红活麻总香豆素高剂量组（100mg/kg）12只、红活麻总香豆素中剂量组（50mg/kg）只、红活麻总香豆素低剂量组（25mg/kg）12只。并开始给药，红活麻总香豆素组每日给予相应剂量的红活麻总香豆素，正常对照组和模型组分别给予等体积生理盐水。给药16周，测定大鼠血清测定肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）。取肾脏切片分别做HE和Masson染色，检测大鼠肾脏结构及纤维化程度。Western blot法检测大鼠肾脏 TGF-β1、CTGF、TLR4蛋白表达水平。逆转录PCR检测肾脏TGF-β1、CTGF、TLR4 mRNA的变化。　　结果：（1）大剂量STZ和高糖高脂饲料联合小剂量注射STZ均可建立稳定的DN大鼠模型，表现为大鼠烦渴、多尿、体重降低、血糖升高、尿蛋白升高、肾脏结构和功能受到破坏。2型糖尿病模型出现高血脂症状，且在注射STZ3周即出现尿蛋白升高现象，1型糖尿病则在注射STZ8周时尿蛋白才开始升高。在肾脏结构病理性改变上，1型糖尿病肾病大鼠肾脏组织病理变化以糖原沉积为主要特征，而2型糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织病变有糖原沉积未有1型模型显著，但是其肾脏纤维化程度要高于1型。两种DN大鼠模型肾脏TGF-β1、CTGF、TLR4表达均升高。　　（2）高糖环境培养48h后，HBZY-1细胞体积显著增大，红活麻总香豆素组细胞体积小于高糖组；分别培养24h、48h、96h发现，高糖环境下HBZY-1细胞增殖显著大于正常对照组（P<0.01），红活麻总香豆素高、中、低剂量组细胞增殖速度小于高糖组（P<0.05），且中剂量（50μg/ml）组细胞数目最少。高糖环境下HBZY-1培养48h后，细胞TGF-β1、CTGF、TLR4蛋白水平显著高于正常对照组（P<0.01），红活麻总香豆素各组TGF-β1、CTGF、TLR4蛋白水平均下调，且中剂量组（50μg/ml）下降效果最为显著（P<0.01）。　　（3）红活麻总香豆素可以缓解与糖尿病有关的代谢障碍。与模型组比较，给予红活麻总香豆素后，大鼠体重增长缓慢现象得到了改善（P<0.01）；血糖升高得到缓解，且中剂量组显著低于模型组（P<0.01）。同时，红活麻总香豆素可以提高DN大鼠肾脏功能，并且缓解肾小球的结构破坏。实验显示，红活麻总香豆素可以延缓STZ诱导的糖尿病肾病发病时间，降低24h尿蛋白量（P<0.01），中（50mg/kg）剂量组效果最好。血清肌酐和尿素氮检测显示，红活麻总香豆素可以降低血清肌酐和尿素氮含量（与模型组比较，中低剂量组P<0.01）；病理检测发现红活麻总香豆素可以缓解模型大鼠肾脏水肿、纤维化、糖原沉积等结构破坏。此外，红活麻给药组肾脏组织中TGF-β1、CTGF、TLR4表达均显著显著下调，提示，红活麻总香豆素对DN保护作用可能与降低TGF-β1、TLR4有关。　　结论：（1）尾静脉大剂量注射STZ和高糖高脂饲料联合小剂量注射STZ均可成功诱导大鼠糖尿病肾病模型。两种DN模型在发病时间、脂代谢和肾脏病理改变方面存在差异。TGF-β1、TLR4均参与1型和2型糖尿病肾病的发展。　　（2）高糖环境下，红活麻总香豆素可以抑制HBZY-1细胞增生，同时降低TGF-β1、TLR4水平。　　（3）红活麻总香豆素对STZ诱导的DN大鼠模型有保护作用，其机制可能与降低DN大鼠肾脏TGF-β1、TLR4水平有关。