【摘 要】
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本文通过ELISA、原位杂交、免疫组化、实时定量PCR和Western blot方法,发现富含半胱氨酸酸性分泌糖蛋白(SPARC)在ADPKD患者尿液和囊液中的浓度显著升高,这些浓度升高的SPARC可
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本文通过ELISA、原位杂交、免疫组化、实时定量PCR和Western blot方法,发现富含半胱氨酸酸性分泌糖蛋白(SPARC)在ADPKD患者尿液和囊液中的浓度显著升高,这些浓度升高的SPARC可能来自囊肿衬里上皮细胞及扩张的小管和集合系统分泌。我们利用原核表达系统表达并纯化了rhSPARC,通过BrdU,ELISA、流式细胞术、免疫细胞化学、透射电镜等技术,发现rhSPARC能够抑制细胞周期调控基因ClnD1、促进P21Waf1的表达,阻止细胞通过G1-S期限制点,抑制多种因素激活的MAPK信号转导通路,有效抑制囊肿衬里上皮细胞增殖。此外,rhSPARC能够通过对凋亡相关基因Bcl-2与Bax的调控诱导囊肿衬里上皮细胞凋亡。
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