林麝(Moschus berezovskii)是重要的药用资源动物，目前已处于濒危状态，列为国家Ⅰ类保护动物，纳入CITES附录Ⅱ。中国自上世纪50年代末开始人工饲养林麝，但受到组织样本获取等方面的制约，该物种的繁殖生理、应激生理及免疫生理研究一直较为薄弱，严重影响了人工养麝业的发展。为此，本研究采用非损伤性取样方法(noninvasive sampling)及酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)技术，开展林麝的繁殖生理、应激生理和免疫生理指标的测定，旨在建立该物种的非损伤研究方法，探索其生存状态，为林麝养殖业提供有益的科学依据。本研究于2009年至2010年在陕西凤县屋梁山林麝养殖中心开展了相关工作，取得的主要研究结果如下:　　 1.林麝粪便类固醇激素的保存时效，在室温下(20℃)保存林麝新鲜粪样，其孕酮于48h时呈显著升高;雌二醇于18h时呈显著升高，随后为下降的趋势;睾酮于18h时呈现显著升高;皮质醇于18h时呈显著下降，随后逐步升高。采用90％甲醇保存林麝新鲜粪便，其孕酮、睾酮和皮质醇分别于45d、15d及30d出现显著变化，而雌二醇到2个月未见显著差异。抗生素保存的类固醇激素含量，最长至15天，最短7天就有显著变化，明显比未处理延长了保存的时间，但却比90％甲醇保存时间要短。　　 2.林麝发情和怀孕期性激素的变化，测定雌性林麝在发情和怀孕期的粪便孕酮及雌二醇的含量，得出发情周期为21.94±1.2d;雌性林麝在怀孕的第二周孕酮含量就有显著的上升，然后逐渐上升直至分娩前一个月达到最高点并逐渐下降，至分娩后急剧下降。粪便雌二醇在整个发情和怀孕期变化规律不明显。因此，试验结果表明，雌性林麝粪便孕酮值可以作为怀孕的非损伤监测指标，用来监测和研究林麝的繁殖活动。　　 3.非孕期林麝粪便皮质醇含量的变化，雌雄林麝粪样皮质醇测定得出，雌麝于育幼期的第一阶段，尤其是处于分娩和食物转换的前4周，应激生理较高。同理，雄麝于食物转换的5月份也表现出应激水平上升的现象。因此，我们认为，在雌雄林麝处于较高水平的应激生理状态时，需要加强圈养林麝的饲养和管护工作，尽可能减少惊扰等刺激因素。　　 4.林麝免疫球蛋白的季相变化，雌雄林麝粪便IgG、IgM和IgA浓度测定得出，雌雄林麝粪便IgG和IgM均不存在年季相变化节律，表明林麝随季节的变化其抗感染力和发生感染的强度均没有显著变化。同时，粪便IgA浓度在6月份显著高于其他各月份。我们认为，进入6月份后圈舍内微生物活动增强，同时，林麝开始取食新鲜树叶，会直接影响到林麝的免疫应答，这一时期IgA的上升是林麝消化道应对环境微生物的结果，也说明春夏变换季节是林麝饲养管护的重要时期，应更加注意草料、饮水和圈舍的卫生状况。　　 5.林麝幼体免疫球蛋白的变化，幼麝粪便IgG和IgM水平呈现出三个变化阶段。第一阶段（2～11周左右）幼麝哺乳期，呈逐步上升趋势;第二阶段（12～16周）幼麝开始断奶，摄食了部分鲜嫩树叶和饲料，此时的IgG和IgM水平下降;第三阶段（16～21周）回升至较高水平，此时幼麝自身免疫生理已初步建立并逐步保持相对稳定状态。研究认为，幼体林麝肠道中IgA的含量在其出生的2～21周都维持在一个稳定的水平上。　　 6.幼麝与母体之间免疫球蛋白相关性，分析两者数据得出，圈养幼麝与母麝粪便中IgG含量在幼体出生后的2～21周呈显著的负相关关系，表明在哺乳期幼麝主要免疫力源于母乳。此后，随着吸乳量的减少，IgG含量明显降低。同时幼麝自身的免疫系统在逐渐建立和完善，因而在16周龄左右幼麝的IgG值再一次开始升高，直到18周龄幼麝的IgG值达到最高并趋于稳定，表明这时幼麝自身的免疫系统基本形成。幼麝与母麝粪便IgM和IgA含量在幼体出生后的2～21周没有显著的相关关系。　　 本研究证明，采用粪便取样的非损伤方法可用于研究林麝的繁殖生理、应激生理和免疫生理，是研究及评估该物种生理及生存状态的重要途径。