近红外光谱与富集技术用于溶液中DNA的定量分析研究

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近红外光谱技术具有方便、快速以及无损分析等优点,在很多领域得到了广泛应用。然而,近红外光谱吸收较弱、谱峰较宽且重叠严重,因此近红外光谱技术的定性定量分析需要借助于化学计量学方法。另外,近红外光谱分析的检测灵敏度较低,不适合于复杂样品中低含量组分的定量分析,其应用受到了一定限制。DNA是一种重要的生命物质,是遗传信息的携带者和基因表达的基础,其定量分析在临床检验、生命科学以及环境等研究领域都具有非常重要的意义,而DNA在研究体系中的含量一般较低,不能直接用近红外光谱进行测定。本论文针对近红外光谱技术检测灵敏度低,不能直接对低含量的DNA进行测定的问题,开展了吸附预富集技术用于近红外光谱分析的研究,用于提高近红外光谱分析的灵敏度,使之能够对低含量的DNA进行测定。具体内容包括以下两个方面:   1.合成了一种对DNA具有吸附作用的氨基化硅壳材料(AMSP)用于近红外漫反射光谱对DNA的定量分析。以鱼精DNA为分析对象,用AMSP对DNA进行吸附富集后,无需洗脱,直接采集吸附上DNA的AMSP的近红外漫反射光谱,偏最小二乘回归用于建立定量模型。结果表明,富集技术用于近红外漫反射光谱分析,为稀溶液中DNA的定量分析提供了一种可行的方法。   2.为了实现对稀溶液中DNA进行更加快速方便的定量分析,合成了磁性氨基化硅壳材料(MAMSP),并将其作为吸附剂用于溶液中DNA的近红外漫反射光谱定量分析。MAMSP对DNA进行吸附富集后,在外加磁铁的作用下很容易从溶液中分离出来,分离步骤简单,且无需洗脱,直接采集吸附富集上DNA的MAMSP的近红外漫反射光谱,建立偏最小二乘回归模型。结果表明,磁性材料的吸附预富集技术可用于近红外漫反射光谱分析,为稀溶液中DNA的定量分析提供了一种可能的快速方便方法。
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