重组人胸腺素α原抗肿瘤活性及机理研究

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胸腺素α原(Prothymosinα,ProTα)是胸腺素α1(Tα1)的前体蛋白,在哺乳动物细胞中广泛分布,在淋巴组织及非淋巴组织均可找到。在细胞内,ProTα作为一种核蛋白,参与对细胞周期的调节,促进细胞增殖;在细胞外,胸腺素α原通过潜在的膜受体调节免疫应答,促进IFN-γ、TNF-α、IL-2等细胞因子的产生,进而增强细胞和体液免疫应答。   胸腺素α原作为一种免疫调节因子,对抑制肿瘤生长有一定效果。本实验主要研究胸腺素α原分别联合白介素-2和γ-干扰素,对荷瘤小鼠的肿瘤抑制效果,实验结果证明胸腺素α原联合白介素-2的抑瘤效果优于单独使用。对肿瘤组织进行H&E染色,观察肿瘤细胞,可看出被抑制肿瘤细胞的凋亡状况。另外,通过MTT法证明,在体外环境中加入胸腺素α原,不能促进或是抑制肿瘤细胞生长,说明它是通过调节免疫功能达到间接抑制肿瘤的效果。分离获得肿瘤抑制实验中的小鼠血清样品,通过ELISA方法分析其中γ-干扰素和肿瘤坏死因子-α,发现使用胸腺素α原联合白介素-2的小鼠血清样品,这两种细胞因子含量均较其他组高,具有显著性差异(P<0.05),说明胸腺素α原联合白介素-2后,增强了机体免疫能力,抑制了肿瘤生长。TLRs信号通路可导致肿瘤细胞逃脱免疫监视,进而促进肿瘤细胞增长,通过分离肿瘤抑制实验中的小鼠肿瘤组织,采用半定量反转录-聚合酶链反应方法检测肿瘤组织中TLR2和TLR4的表达量。在本实验中,发现胸腺素α原联合白介素-2的小鼠肿瘤组织中,TLR2和TLR4表达量均较其他组低,同样说明胸腺素α原联合白介素-2通过某种发生抑制了TLR2和TLR4的表达。具有显著性差异(P<0.05)。本研究从分子,免疫和蛋白水平揭示从中国健康青年人外周血淋巴细胞克隆表达的人胸腺素α原作为一种免疫调节因子,在动物体内有效抑制动物和人肿瘤细胞株的生长的作用机制,为进一步研究开发ProTα作为抗肿瘤药物提供科学依据。
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