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目的:建立显微镜观察药物敏感性检测技术(microscopic observation drugsusceptibilit,MODS),并将该技术用于结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)的耐药性检测,探讨其临床应用价值。方法:在24孔细胞培养板中加入液体培养基、抗结核药物、以及菌液进行培养,然后镜下观察结果。首先对MODS方法学进行探讨,然后应用MODS技术检测MTB临床分离株耐药性,并与传统罗氏法进行比较,对不符合菌株进行最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)检测,以判定其耐药性。结果:MTB标准株和66株临床分离株都能形成索状结构,23株非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)和8株非分枝杆菌不能形成索状结构,只有堪萨斯和海分枝杆菌会形成索状结构。3.0×10~3CFU/ml浓度不仅镜下观察效果好,而且可以缩短索状结构观察时间。应用MODS技术对66株MTB临床分离株进行链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇耐药性检测,检测结果显示,MODS检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与传统罗氏法符合率分别为97.0%、90.9%、95.5%、86.4%。如以传统罗氏法为判断标准,则MODS检测链霉素的敏感度为96.0%、特异度为97.6%、阳性和阴性预测值(PPV、NPV)及准确性分别为96.0%、97.6%和97.0%;检测异烟肼、利福平和乙胺丁醇的敏感度、特异度、PPV、NPV及准确性分别为100%、85.4%、81.0%、100%、90.9%;96.2%、95.0%、92.6%、97.4%、95.5%和73.7%、91.5%、77.8%、89.6%、86.4%。共有16株菌的20个药敏结果MODS与传统罗氏法不符,MIC检测结果有14株16个药敏结果与MODS结果一致,4株菌4个药敏结果与传统罗氏法一致。应用MODS技术对110份荧光染色阳性痰标本进行了直接药敏检测,其中最快可在7天获得药敏结果。结论:MODS技术同时检测链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇药敏结果具有快速、操作简便和价廉等优点,与传统罗氏法有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速检测方法之一。