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第一部分淫羊藿苷对卵蛋白诱导大鼠哮喘性气道炎症的影响目的：观察淫羊藿苷对卵蛋白诱导大鼠哮喘性气道炎症的影响。方法：(1)72只雄性SD大鼠随机分为6组,每组12只,分别是正常对照组(PBS)、模型组(OVA)、阳性对照组(OVA+地塞米松组)和OVA+淫羊藿苷低、中、高剂量组(5、10、20mg/kg-1);(2)采用卵蛋白(OVA)致敏和反复激发大鼠建立哮喘模型；(3)采用HE染色观察淫羊藿苷对OVA诱导的大鼠肺组织炎症浸润的干预作用及病理学评分的影响；(4)观察6组外周血总细胞数、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞计数情况；(5)采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-4、IFN-γ、IL-13和TNF-α的含量；(6)取各组大鼠肺泡灌洗液,采用酶联免疫吸附测定法检测肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ的含量。结果：(1)淫羊藿苷对大鼠哮喘模型肺组织病理学和炎症分级评分影响的结果显示：OVA+淫羊藿苷高剂量组支气管、血管和周围肺组织有炎性细胞浸润,支气管上皮可见部分损伤,与模型组相比较,支气管上皮和血管周围的炎症有所减轻。模型组大鼠肺组织炎症评分明显高于正常对照组, OVA+淫羊藿苷高剂量组与模型组相比较,炎症评分降低,差异有显著性(P<0.05)；(2)淫羊藿苷对大鼠哮喘模型外周血细胞计数的影响结果显示：模型组外周血总细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞与正常对照组相比较均显著增加,OVA+淫羊藿苷高剂量组对嗜酸性粒细胞和巨噬细胞抑制明显,差异有显著性(P<0.05)；(3)淫羊藿苷对大鼠哮喘模型外周血细胞因子影响的结果显示：模型组大鼠血清IL-4、IL-13和TNF-α水平与正常对照组相比较均显著增加,血清IFN-γ水平显著降低。OVA+淫羊藿苷高、中剂量组对哮喘大鼠血清IL-4、IL-13和TNF-α水平抑制明显,差异具有显著性(P<0.05),淫羊藿苷高剂量组能够增加大鼠哮喘模型血清IFN-γ的表达水平,差异有显著性(P<0.05)；(4)淫羊藿苷对大鼠哮喘模型肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ表达影响的结果显示：模型组大鼠肺泡灌洗液中IL-4表达明显高于正常对照组；OVA+淫羊藿苷高剂量组与哮喘模型组相比较,大鼠肺泡灌洗液中IL-4表达明显降低,差异有显著性(P<0.05),哮喘模型组大鼠肺泡灌洗液中IFN-γ表达明显低于正常对照组,淫羊藿苷治疗组与哮喘模型组相比较,大鼠肺泡灌洗液中IFN-γ表达有所升高,差异有显著性(P<0.05)。结论：(1)淫羊藿苷具有改善哮喘大鼠肺组织炎症的作用；(2)淫羊藿苷具有抑制哮喘大鼠外周血嗜酸性粒细胞和巨噬细胞聚集的作用；(3)淫羊藿苷具有抑制哮喘大鼠血清和肺泡灌洗液中炎症细胞因子的作用。第二部分淫羊藿苷对大鼠哮喘性气道炎症影响的分子机制研究目的：观察淫羊藿苷对卵蛋白诱导大鼠Th1/Th2细胞因子失衡表达的影响及机理探讨。方法：(1)60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(PBS)、模型组(OVA诱导)、地塞米松组、OVA+淫羊藿苷低、中、高剂量组(5、10、20mg/kg-1);(2)采用卵蛋白(OVA)致敏和激发大鼠建立哮喘模型；(3)采用ELISA法观察淫羊藿苷对各组大鼠肺组织IL-4和IFN-γ的含量的影响；(4)采用免疫组化染色观察淫羊藿苷对各组大鼠肺组织T-bet和GATA-3的干预作用；(5)采用Realtime RT-PCR法观察淫羊藿苷对各组大鼠肺组织和脾脏淋巴细胞T-bet和GATA-3 mRNA表达的干预作用；(6)采用Western blot法观察淫羊藿苷对各组大鼠肺组织T-bet、GATA-3和NF-kB p65蛋白表达的干预作用。结果：(1)各组大鼠肺组织ELISA结果显示,OVA+淫羊藿苷中、高剂量组与哮喘模型组相比较,大鼠肺组织IL-4表达明显降低,差异有显著性(P<0.05),大鼠肺组织IFN-γ表达有升高趋势,但是无统计学意义(P>0.05)；(2)各组大鼠肺组织GATA-3和T-bet免疫组化染色结果显示,OVA+淫羊藿苷高剂量组GATA-3染色明显减少,T-bet染色没有明显减少；(3)各组大鼠肺组织和脾脏淋巴细胞T-bet和GATA-3 mRNA表达结果显示,淫羊藿苷治疗组与哮喘模型组相比较,大鼠肺组织中T-bet和GATA-3 mRNA表达明显降低,差异有显著性(P<0.05)；哮喘模型组大鼠脾脏淋巴细胞中GATA-3和T-betmRNA表达明显高于正常对照组,淫羊藿苷治疗组与哮喘模型组相比较,大鼠肺组织中GATA-3 mRNA表达明显降低,差异有显著性(P<0.05), T-bet mRNA表达有所降低,但是差异无显著性(P>0.05)；(4)各组大鼠肺组织T-bet和GATA-3蛋白表达的结果显示,模型组T-bet和GATA-3表达与PBS对照组相比较显著增加,淫羊藿苷能够抑制GATA-3蛋白的增加,而对T-bet的抑制作用不明显；(5)各组大鼠肺组织NF-kB p65免疫组化染色结果显示,OVA+淫羊藿苷高剂量组的支气管、血管黏膜下和周围肺组织有炎性细胞浸润,NF-kB p65着色细胞较少,与模型组相比较,NF-kB p65阳性表达较少；(6)各组大鼠肺组织NF-kB p65蛋白检测结果显示,淫羊藿苷治疗组的p65总蛋白的表达减少,胞浆p65蛋白表达增加。结论：(1)淫羊藿苷能够调节哮喘大鼠肺组织Th1/Th2相关细胞因子表达失衡；(2)淫羊藿苷能够调节哮喘大鼠肺组织和脾脏淋巴细胞中Th1/Th2相关转录因子(T-bet/GATA-3)表达失衡；(3)淫羊藿苷具有抑制哮喘大鼠肺组织NF-kB p65蛋白激活的作用。第三部分淫羊藿苷调控内毒素诱导炎症反应的体内及体外实验研究目的：本研究旨在探讨淫羊藿苷在抑制LPS诱导的体内和体外炎症反应中的作用及信号转导机制。方法：(1)肺组织HE染色观察淫羊藿苷对LPS诱导的急性炎症的影响；(2)检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)观察淫羊藿苷对LPS诱导的炎症反应的影响；(3)ELISA法观察淫羊藿苷对各组小鼠血清细胞因子的抑制作用(TNF-α, PGE2和NO); (4) Real-time RT-PCR观察淫羊藿苷对各组小鼠肺组织TNF-α、iNOS和COX-2mRNA表达的影响；(5) Western blot观察淫羊藿苷对PI3K/AKT的激活作用；(6)共聚焦和EMSA观察淫羊藿苷对NF-kB p65激活的抑制作用。结果：淫羊藿苷(20 mg/kg-1)干预后,能抑制LPS诱导的小鼠肺组织TNF-α、IL-6和COX-2 mRNA表达的增加；淫羊藿苷能够降低过氧化物酶(MPO)活性；在RAW 264.7细胞中,淫羊藿苷对LPS的细胞毒作用具有保护作用；免疫印迹和共聚焦显微镜分析表明,淫羊藿苷预处理RAW 264.7巨噬细胞后,能够减少p65核转位；淫羊藿苷能够激活PI3K/AKT信号通路。结论：(1)淫羊藿苷具有抑制LPS诱导的小鼠肺组织炎症反应的作用；(2)淫羊藿苷能够抑制LPS诱导的小鼠肺组织炎症因子基因表达；(3)淫羊藿苷能够抑制p65从胞浆进入细胞核；(4)淫羊藿苷能够激活PI3K/AKT信号通路。