目的：研究运用体外培养的角膜缘干细胞联合人羊膜的方法，行自体移植治疗角膜缘干细胞完全缺乏的兔眼。方法：选用健康新西兰白兔20只，显微镜下手术制成右眼角膜缘干细胞缺乏的兔眼模型，其中12只兔左眼取少量的角膜缘组织进行体外培养、扩增一周左右，然后传代并种植于无上皮的人羊膜上，继续培养约20天左右制成人工合成角膜上皮移植片，采用自体移植的方法，移植到相应的12只角膜缘干细胞完全缺乏的兔眼模型上，另外8只兔只进行无上皮细胞羊膜的移植。结果：移植了含有自体角膜上皮细胞的羊膜的兔眼，术后早期都形成了角膜上皮化并明显抑制了新生血管的再生，通过角膜荧光素染色、苏木素-伊红(HE)染色、细胞角蛋白AE1单克隆抗体免疫组化以及扫描电镜和透射电镜观察，证明培养并移植的角膜上皮与正常的角膜上皮无明显差异；而只接受羊膜移植的兔子，术后患眼又出现角膜混浊和明显的新生血管，角膜HE染色示复层上皮细胞，排列不规则，夹杂空泡样杯状细胞，其下基质可见炎性细胞、红细胞和新生血管，表明角膜表面有结膜上皮覆盖。结论：利用无上皮细胞的羊膜作为载体，体外培养角膜缘干细胞并自体移植，术后早期可以恢复角膜上皮化、抑制新生血管生长，并且不会发生免疫排斥反应。动物实验证明这一技术是有效的、可行的。